[发明专利]一种利用木糖母液发酵产丁二酸所用的菌株及其生产方法有效
申请号: | 201710076734.1 | 申请日: | 2017-02-13 |
公开(公告)号: | CN106801026B | 公开(公告)日: | 2020-05-12 |
发明(设计)人: | 申乃坤;李亿;王青艳;朱婧;秦艳 | 申请(专利权)人: | 广西科学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/46;C12R1/01 |
代理公司: | 南宁深之意专利代理事务所(特殊普通合伙) 45123 | 代理人: | 徐国华 |
地址: | 530007 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 母液 发酵 产丁二酸 所用 菌株 及其 生产 方法 | ||
1.一种利用木糖母液发酵产丁二酸所用的菌株,其特征在于,该菌株为产琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succinogenes)PZ,保藏编号为: CCTCC NO: M2016396;
所述的木糖母液发酵产丁二酸的发酵方式为分批发酵或分批补料发酵中的任一种;
所述分批发酵时所述发酵培养基的成分及浓度为:木糖母液总糖30-100g/L,氮源5-20g/L,磷酸二氢钾2-10g/L,碳酸氢钠2-10g/L,氯化钙0.3-1.0g/L,氯化镁0.3-1.0g/L,所述木糖母液的总糖浓度为50-80%W:V;
所述分批补料发酵时所述发酵培养基的成分及浓度为:木糖母液初始总糖30-40 g/L,氮源5-20g/L,磷酸二氢钾2-10g/L,碳酸氢钠2-10g/L,氯化钙0.3-1.0g/L,氯化镁0.3-1.0g/L,发酵过程中间歇流加总糖浓度为200-300g/L的木糖母液,控制发酵液的总糖为30-35 g/L,所述木糖母液的总糖浓度为50-80%W:V。
2.一种利用木糖母液发酵产丁二酸的方法,其特征在于,包括利用权利要求1所述的产琥珀酸放线杆菌发酵生产丁二酸。
3.一种如权利要求2所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:将平板上的产琥珀酸放线杆菌PZ单菌落接入种子培养基中,在厌氧培养箱或普通培养箱中36-38℃培养16-20h,菌数达3亿以上,再按照5%V/V接种量进行二级扩繁培养8h,菌数达3亿以上,即得到液态种子;按5-15%V/V的接种量将液态种子接种到发酵培养基中,利用pH缓冲剂调节发酵液pH维持在6.5-7.0,在充满N2或CO2的环境中,转速100-200r/min,温度为36-38℃,分批发酵或分批补料发酵30-72h,即得丁二酸。
4.根据权利要求3所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,所述种子培养基的成分及浓度为:葡萄糖8g/L,酵母粉12g/L,玉米浆4g/L,NaHCO34g/L,NaH2PO49.6g/L,K2HPO41.55g/L。
5.根据权利要求3所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,分批发酵时所述发酵培养基的成分及浓度为:木糖母液总糖30-100g/L,氮源5-20g/L,磷酸二氢钾2-10g/L,碳酸氢钠2-10g/L,氯化钙0.3-1.0g/L,氯化镁0.3-1.0g/L,所述木糖母液的总糖浓度为50-80%W:V。
6.根据权利要求3所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,分批补料发酵时所述发酵培养基的成分及浓度为:木糖母液初始总糖30-40 g/L,氮源5-20g/L,磷酸二氢钾2-10g/L,碳酸氢钠2-10g/L,氯化钙0.3-1.0g/L,氯化镁0.3-1.0g/L,发酵过程中间歇流加总糖浓度为200-300g/L的木糖母液,控制发酵液的总糖为30-35 g/L,所述木糖母液的总糖浓度为50-80%W:V。
7.根据权利要求5或6所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,所述发酵培养基的氮源为玉米浆、酵母粉、大豆粉、花生饼粉中的一种或几种以任意比例混合。
8.根据权利要求3所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,所述pH缓冲剂为碱式碳酸镁、碳酸钠、氢氧化镁、氢氧化钠中的一种或几种以任意比例混合,总浓度为20-80g/L。
9.根据权利要求7所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,分批发酵时所述发酵培养基的成分及浓度为:木糖母液总糖40g/L,玉米浆12g/L,磷酸二氢钾6g/L,碳酸氢钠6g/L,氯化钙0.6g/L,氯化镁0.7g/L,所述木糖母液的总糖浓度为60%W:V。
10.根据权利要求7所述利用木糖母液发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,分批补料发酵时所述发酵培养基的成分及浓度为:木糖母液初始总糖40 g/L,玉米浆20g/L,磷酸二氢钾10g/L,碳酸氢钠10g/L,氯化钙1.0g/L,氯化镁1.0g/L,发酵过程中间歇流加总糖浓度为300g/L的木糖母液,控制发酵液的总糖为35 g/L,所述木糖母液的总糖浓度为80%W:V。
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