[发明专利]一种用于造血干细胞培养的滋养层的制备方法在审
| 申请号: | 201710076709.3 | 申请日: | 2017-02-13 |
| 公开(公告)号: | CN106754715A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
| 发明(设计)人: | 罗茂文;陈强;杨本艳姿;段海峰;张博 | 申请(专利权)人: | 四川新生命干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/0789 | 分类号: | C12N5/0789 |
| 代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222 | 代理人: | 李高峡,张娟 |
| 地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 造血 干细胞 培养 滋养 制备 方法 | ||
1.一种制备用于造血干细胞的滋养层的方法,其特征在于:步骤如下:
(1)取细胞培养板,包被胶原蛋白,得包被了胶原蛋白的细胞培养板;
(2)取间充质干细胞悬液,接种到步骤(1)中包被了胶原蛋白的细胞培养板中,培养至细胞融合度为70-90%时,即可。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述胶原蛋白是鼠尾胶原蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,每孔包被0.8-1.2ml胶原蛋白,优选为1ml胶原蛋白。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,接种的间充质干细胞悬液的浓度为1×105~1.5×105个细胞/孔。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,培养采用的培养基为用于造血干细胞培养的无血清培养基。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述无血清培养基培养为SFEM无血清培养基。
7.权利要求1~6任意一项方法制备得到的滋养层。
8.根据权利要求7所述的滋养层在培养造血干细胞中的用途。
9.一种造血干细胞的培养方法,其特征在于:它是权利要求7所述的滋养层为滋养层进行培养。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:步骤如下:取权利要求7所述的滋养层,接种造血干细胞,加入无血清培养基,培养即可;所述无血清培养基是每1ml添加有50-100ng SCF、25-50ng TPO、10-50ng Flt-3L的SFEM无血清培养基。
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