[发明专利]甘油在保护I型胶原蛋白的三股螺旋结构中的应用方法

说明书

技术领域

本发明涉及无菌用胶原蛋白技术领域，具体涉及甘油在保护I型胶原蛋白的三股螺旋结构中的应用方法。

背景技术

胶原蛋白属于生物高分子。胶原蛋白种类较多，常见类型为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅴ型和Ⅺ型。其中，I型胶原蛋白因具有低免疫源性、与宿主细胞及组织之间协调作用、止血作用和生物可降解等优势，因此I型胶原蛋白作为生物医学材料在临床应用广泛，如手术缝合线、止血纤维、止血海绵、水凝胶、敷料、人工皮肤、人工血管、角膜及药物载体等。I型胶原蛋白是纤维形成胶原，是多细胞生物的细胞外的主要结构大分子，能活化上皮细胞，促进上皮细胞增生，也可促进胶原酶生成，使皮肤有张力和弹性，能淡化眼纹和消除眼袋及阴影，在美容与保健方面应用广泛，适用于轻中度炎症痤疮、痤疮愈后早期色素沉着、痤疮愈合后早期表浅性疤痕的治疗；对治疗皮肤过敏，减轻激光、光子治疗术后疤痕的形成有辅助疗效；在创面愈合期有减轻色素沉着和促进创面愈合的作用。

I型胶原蛋白的结构呈三股螺旋结构，由三条α肽链组成，分子量约为300KDa。从动物肌腱中提取的I型胶原蛋白含2条α₁肽链和1条α₂肽链，在凝胶电泳图中分子量为100kDa处有两条谱带，一条谱带是由于两条α₁肽链重合所得到的，另一条谱带表示单条的α₂肽链。图谱中在分子量为200kDa处也有一条谱带，对应于胶原结构中的β链，β链是α肽链的二聚体。当凝胶电泳图中不显示谱带时，表示I型胶原蛋白的三股螺旋结构受到破坏。

现有技术中，利用I型胶原蛋白制备手术缝合线、止血纤维、止血海绵、水凝胶、敷料、人工皮肤、人工血管、角膜或药物载体等时，为了达到无菌要求，一般进行辐照灭菌，然而，I型胶原蛋白在辐照灭菌中，其三股螺旋结构会被破坏，进而破坏了I型胶原蛋白的功效，因此严重限制了I型胶原蛋白的广泛应用。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供甘油在保护I型胶原蛋白的三股螺旋结构中的应用方法，以利于制备无菌I型胶原蛋白溶液。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

提供甘油在保护I型胶原蛋白的三股螺旋结构中的应用方法，它包括以下步骤：

步骤一，将I型胶原蛋白用溶剂溶解后，得到I型胶原蛋白溶液；

步骤二，往步骤一制得的I型胶原蛋白溶液中加入甘油，充分混合均匀，得到混合溶液；

步骤三，选用包装材料将步骤二得到的混合溶液进行包装，然后进行辐照灭菌，即制得无菌I型胶原蛋白溶液。

上述技术方案中，所述步骤一中，所述I型胶原蛋白来源于牛跟腱、猪跟腱或羊跟腱中的一种或任意两种以上的组合物。

上述技术方案中，所述步骤一中，所述I型胶原蛋白来源于动物提取物。

上述技术方案中，所述步骤一中，所述I型胶原蛋白为经过发酵或人工重组方法而获得的I型胶原蛋白。

上述技术方案中，所述步骤一中，所述溶剂为水、有机酸、无机酸或缓冲对中的一种或任意两种以上的组合物；

所述有机酸为乙酸、甲酸、苹果酸或柠檬酸；所述无机酸为盐酸、硫酸或磷酸；所述缓冲对为醋酸-醋酸钠缓冲对、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲对或磷酸盐缓冲对。

上述技术方案中，所述步骤一中，所述I型胶原蛋白与所述溶剂之间的重量比为1~10:5000。

上述技术方案中，所述步骤二中，所述甘油占所述I型胶原蛋白溶液的重量比为0.5%~40%。

上述技术方案中，所述步骤三中，所述辐照灭菌为钴60辐照灭菌或者电子束辐照灭菌。

上述技术方案中，所述步骤三中，所述包装材料为玻璃容器、塑料容器或铝塑袋。

上述技术方案中，所述步骤二中，往步骤一制得的I型胶原蛋白溶液中加入甘油的同时还加入防腐剂，所述防腐剂为山梨酸钾、山梨酸或苯甲醇，所述防腐剂占所述I型胶原蛋白溶液的重量比为0.1%~5%。

本发明与现有技术相比较，有益效果在于：