[发明专利]一种复合生物菌肥及其制备方法

权利要求书

1.一种复合生物菌肥，其特征是，由以下原料制备而成：

氮磷钾肥 200-300重量份

荧光假单孢杆菌菌液 0.1-0.5重量份

淡紫拟青霉菌菌液 0.1-0.5重量份

地衣芽孢杆菌菌液 0.1-0.5重量份

载体 2-5重量份

菌种保护剂 3-7重量份。

2.如权利要求1所述的复合生物菌肥，其特征是，由以下原料制备而成：

氮磷钾肥 230-270重量份

荧光假单孢杆菌菌液 0.2-0.3重量份

淡紫拟青霉菌菌液 0.1-0.2重量份

地衣芽孢杆菌菌液 0.2-0.3重量份

载体 4-5重量份

菌种保护剂 4-5重量份。

3.如权利要求1所述的复合生物菌肥，其特征是，所述载体为滑石粉或硅藻土。

4.如权利要求1所述的复合生物菌肥，其特征是，所述菌种保护剂为二甲基亚砜、羧甲基纤维素钠、山梨醇、甘露醇、海藻糖、谷氨酸钠或磷酸盐中的一种或两种以上。

5.一种复合生物菌肥的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)荧光假单孢杆菌菌液的制备

将荧光假单胞杆菌接种到金氏B培养基中，于30～35℃、150r/min振荡培养18～20小时，然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏B培养基平板上，于30～35℃培养箱中培养18～20小时，挑取单菌落再次接种到金氏B培养基中，于30～35℃、150r/min振荡培养18～20小时，得荧光假单胞杆菌培养液，将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏B培养基中，于30～35℃、150r/min振荡培养18～20小时，得荧光假单胞杆菌种子液，然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏B培养基的发酵罐中，连续培养24～30小时，得荧光假单胞杆菌液；

(2)淡紫拟青霉菌菌液的制备

将淡紫拟青霉菌接入PDA液体培养基，于25～28℃、60～120r/min条件下在摇床上振荡培养48～72小时，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，于25～28℃、60～120r/min条件下培养3～5天，待长出粗壮菌丝后，挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基，培养得到一级斜面菌种，将所述一级斜面菌种接入PDA液体培养基，于25～28℃、60～120r/min条件下培养48～72小时，得二级摇瓶种子液，将所述二级摇瓶种子液接入PDA液体培养基，于PH7.0～7.2、25～28℃条件下发酵3～5天，即得淡紫拟青霉菌菌液；

(3)地衣芽孢杆菌菌液的制备

将地衣芽孢杆菌于20～35℃、密闭条件下，在活化培养基中接种、活化培养10～36小时，然后于PH7.0～7.2、20～35℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁24～72小时，在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌，即得地衣芽孢杆菌菌液；

(4)复合生物菌剂的制备：将上述所得的荧光假单孢杆菌菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液分别经载体吸附、烘干、粉碎，得荧光假单孢杆菌菌粉、淡紫拟青霉菌菌粉和地衣芽孢杆菌菌粉，将三种菌粉，混合，得复合微生物菌剂；

(5)复合生物菌肥的制备：将所述复合微生物菌剂与氮磷钾肥及菌种保护剂混合均匀，即得。

6.如权利要求5所述的复合生物菌肥的制备方法，其特征是，步骤(3)中，所述活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水。

7.如权利要求6所述的复合生物菌肥的制备方法，其特征是，所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000。

8.如权利要求5所述的复合生物菌肥的制备方法，其特征是，步骤(3)中，所述发酵培养基为蛋白胨、牛肉膏、氯化镁、玉米粉、蔗糖、淀粉、硫酸亚铁、磷酸二氢钾和无菌水。

9.如权利要求8所述的复合生物菌肥的制备方法，其特征是，所述蛋白胨、牛肉膏、氯化镁、玉米粉、蔗糖、淀粉、硫酸亚铁、磷酸二氢钾和无菌水的质量百分比为180∶8∶4∶400∶300∶100∶8∶5∶2000。