[发明专利]一种积雪草药材及其提取物与制剂的质量检测方法

权利要求书

1.一种积雪草药材及其提取物与制剂的质量检测方法，其特征在于，所述的方法包括如下步骤：

(1)积雪草苷对照品溶液的制备

称取积雪草苷，加甲醇溶解，摇匀，作为积雪草苷对照品储备溶液；吸取积雪草苷对照品储备溶液，加甲醇制成每1ml含0.1736mg的积雪草苷对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

称取积雪草药材、积雪草药材提取物、积雪草制剂或积雪草粉末，积雪草粉末过二号筛，加入浓度为80％的甲醇，超声处理30分钟，超声处理的功率为210W，频率为40kHz，放冷，称定重量，加80％的甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(3)积雪草苷的含量测定

分别将积雪草苷对照品溶液及供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定供试品溶液中积雪草苷的含量；

(4)计算羟基积雪草苷、积雪草苷-B的含量

利用羟基积雪草苷、积雪草苷-B与积雪草苷之间的校正因子与羟基积雪草苷、积雪草苷-B峰面积计算供试品中羟基积雪草苷、积雪草苷-B的含量；

高效液相色谱仪测定的条件为：

色谱柱：WelchUltimateXB-C18柱4.6×250mm，5μm；

流动相：乙腈-1mmol/Lβ-环糊精水溶液；

流速：1.0ml/min；

柱温：35℃；

检测波长：205nm；

灵敏度：1.2AU；

洗脱程序：梯度洗脱；

梯度洗脱程序为：

时间/min	乙腈/%	β-环糊精水溶液/%
0	15	85
40	35	65
41	75	25
50	75	25

供试品中羟基积雪草苷、积雪草苷-B的含量按下式计算：

Ci＝fsi×(Ai/As)×Cs

式中Ci为待测成分i的浓度，Ai为待测成分i的峰面积，As为参比成分s的峰面积，Cs为参比成分s的浓度，fsi为参比成分s对待测成分i的校正因子；

羟基积雪草苷、积雪草苷B与积雪草苷之间的校正因子f积雪草苷/羟基积雪草苷、f积雪草苷/积雪草苷-B按如下方法计算得到：

分别精密称定积雪草苷、积雪草苷-B和羟基积雪草苷3种对照品置于量瓶中，加甲醇溶解稀释，制得各单一对照品储备液；然后分别量取不同体积单一对照品溶液，混合稀释制成系列浓度混合对照品溶液，备用；

取上述制备得到的混合对照品溶液，进样2、4、6、8、10、15、20μl，用高效液相色谱测定色谱图并进行峰面积积分，选取积雪草苷为内标化合物，利用公式分别计算积雪草苷对羟基积雪草苷、积雪草苷B的校正因子f积雪草苷/羟基积雪草苷、f积雪草苷/积雪草苷-B；

以上所述的公式为：fsi＝fs/fi＝(As/Cs)/(Ai/Ci)，式中As为参比成分s的峰面积，Cs为参比成分s的浓度，Ai为待测成分i的峰面积，Ci为待测成分i的浓度。