[发明专利]吡咯伯克霍尔德氏菌JK‑SH007菌株作为嗜铁素高产菌株的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌株作为嗜铁素高产菌株的应用。

背景技术

铁是所有生命体必需元素之一，在生物生长代谢过程中起着重要作用。尽管在多数土壤中全铁含量丰富，但能被植物吸收利用的可溶性铁含量很低，其溶解度受土壤pH值的影响(pH 7.4时溶解度仅为10^-18mol/L)，中性土壤中主要以难溶性的氧化高铁等形式存在，常常成为限制生命体生长的营养元素。因此，许多微生物合成具有螯合铁离子能力的嗜铁素以获得所需要的铁离子。嗜铁微生物可通过分泌嗜铁素提高环境中铁的生物有效性，从而促进植物的生长，还可通过与病原微生物竞争环境中有限的铁离子，达到控制植物病害的目的。

嗜铁素(siderophore)是一类由微生物在低铁条件下合成的小分子量的，能特异地螯合Fe³⁺的一种螯合因子，合成后被分泌到微生物的细胞外或细胞表面获取Fe³⁺，或者将铁变为可溶形式供给微生物利用。目前已发现500多种化学结构不同的嗜铁素，根据螯合基团的化学特性不同，可分为三大类：氧肟酸型(Hydroxamate)、儿茶酚型(Catechol，即邻苯二酚)和柠檬酸型(α-hydroxycarboxylic)(也称α-羟基羧酸型)。

洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)是一种广泛存在于土壤、水和植物表面的革兰氏阴性菌。1950年Burkholder首次报道该菌可引起洋葱鳞茎腐烂，称为洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)。1992年Yabuuchi等正式将该菌及其它6个属于rRNAII群的假单胞菌(P.solanacerum、P.pickettii、P.gladioli、P.mallei、P.pseudomonas和P.caryophylli)归为一个新属，即伯克氏菌属(Burkholderia)。随着细菌分类技术的发展，洋葱伯克霍尔德氏菌已不仅只是作为一个种，而是一组基因型不同、表型相近的复合物，称为洋葱伯克霍尔德氏菌复合型(Burkholderia cepacia complex，简称Bcc)。目前已报道的Bcc包括10个不同的基因型。

嗜铁素具有防止病虫害、促进植物生长的作用，同时也是环境修复的一种新工具。嗜铁素作为一种铁结合能力极强的物质，在铁吸收干预方面具有巨大的应用前景。目前，去铁灵作为一种嗜铁素，已被开发作为地中海贫血病的一种辅助治疗药物。嗜铁素的种类繁多，化学结构非常复杂，人工化学合成的难度大、步骤多、产率低、成本很高。通过生物工程发酵产生嗜铁素的研究国内外已经开始起步，Calvente等人报道了利用红酵母发酵产生嗜铁素，Sarma等也报道了通过荧光假单胞菌发酵生产嗜铁素。

发明内容

本发明的目的是提供一种吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌株作为嗜铁素高产菌株的应用。

本发明提供的菌株，经分子鉴定为吡咯伯克霍尔德氏菌(B.pyrrocinia)，隶属于洋葱伯克霍尔德氏菌群(Bcc)中的基因型IX，命名为吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌株，保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，编号为M209028，保藏日期为2009年2月18日。吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌株作为嗜铁素高产菌株的应用。

实验证明，吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007菌株产嗜铁素能力较高，产生的嗜铁素含有：儿茶酚型嗜铁素、三羟基氧肟酸型嗜铁素。

附图说明

图1为JK-SH007在CAS检测平板上的生长形态图。

具体实施方式

实施例1

1、培养基配方：

马铃薯葡萄糖培养基(PDB)(真菌活化用)：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，pH7.0，121℃，20min灭菌。

马铃薯葡萄糖固体培养基(PDA)(真菌拮抗平板)：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂15-18g/L，pH7.0，121℃，20min灭菌。

营养肉汤培养基(NB)(细菌活化用)：牛肉浸膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，pH7.2，121℃，20min灭菌。

营养肉汤固体培养基(NA)(细菌拮抗平板)：牛肉浸膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂15-18g/L，pH7.2，121℃，20min灭菌。