[发明专利]一种尿液中巯基化合物的检测试剂及其制备方法与用途

说明书

本发明公开的一种尿液中巯基化合物的检测试剂，包括体积比为1∶1∶2的测试剂、对照试剂、显色试剂；测试剂为纯化水，对照试剂为含汞化合物、含镉化合物的水溶液，显色试剂为含磷钨酸、磷钼酸、含锂化合物的显色缓冲溶液；制备方法包括，(1)测试剂的分装；(2)对照试剂的制备：将含汞化合物、含镉化合物溶解于纯化水中；(3)显色试剂的制备：将磷钨酸、磷钼酸、含锂化合物混合水溶液与缓冲溶液混合；本发明的优点在于，有效避免尿酸、Vc等还原性物质对巯基的干扰，避免出现假阴性结果，使检测结果更为准确和可靠，且制备方法简便、成本低、易于规模化生产。

技术领域

本发明属于生化检测技术领域，具体为一种尿液中巯基化合物的检测试剂及其制备方法与用途。

背景技术

在全世界危害女性健康的恶性肿瘤中，子宫颈癌被列在第三位，据统计，2008年在全球女性所有新发癌症中，新发子宫颈癌所占的比例为9％(529800例)，仅次于乳腺癌和结肠直肠癌。而在女性癌症致死的患者中，女性癌症患者死于宫颈癌的为8％(275100例)，位居第四。而死于子宫颈癌的患者当中又有大约23万人是属于发展中国家的，大约占总人数的83％。在我国，据统计每年新发子宫颈癌患者约例130000例。

子宫颈癌是人体最常见的癌瘤之一，不但在女性生殖器官癌瘤中占首位，而且是女性各种恶性肿瘤中最多见的癌瘤，但其发病率有明显的地区差异。我国宫颈癌的发生，在地理分布上的特点是高发区常连接成片，各省宫颈癌相对高发区的市、县也常有互相连接现象。总的趋势是农村高于城市，山区高于平原。根据29个省、市，自治区 回顾调查我国宫颈癌死亡率占总癌症死亡率的第四位，占女性癌的第二位。宫颈癌患者的平均发病年龄，各国、各地报道也有差异，我国发病年龄以40～50岁为最多，60～70岁又有一高峰出现。

宫颈癌前病变和宫颈癌发病的整个过程中巯基分子不可逆脱落并经尿液排出体外。因此检测尿液中的巯基化合物可用于宫颈癌的筛查和辅助诊断。巯基作为一种还原剂，可以使磷钨酸、磷钼酸还原成钨蓝和钼蓝而呈蓝色，利用这一特点可从尿液中定性测定巯基。

但人体尿液中成分复杂，不同人之间尿液组分差别更大，尤其是尿液中某些微量成分或者因其他病因导致的代谢异常产物同样会与检测试剂中的汞离子、结合生成颜色沉淀，会严重干扰检测结果的准确性，因此目前的巯基类化合物定性检测试剂虽然灵敏很高，但常常会出现假阴性问题。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种尿液中巯基化合物的检测试剂及其制备方法与用途，实现的目的为规避检测试剂容易出现的假阴性问题，使检测结果更为准确。

为了实现上述目的，本发明公开的技术方案为：本发明提供的一种尿液中巯基化合物的检测试剂，包括体积比为1∶1∶2的测试剂、对照试剂、显色试剂；测试剂为纯化水，对照试剂为含汞化合物、含镉化合物的水溶液，显色试剂为含磷钨酸、磷钼酸、含锂化合物的显色缓冲溶液。选择上述成分共同组成检测试剂，是由于在酸性条件下巯基、尿酸、Vc等还原性物质能将磷钨酸、磷钼酸还原成钨蓝和钼蓝而呈现蓝色，因此提高试剂准确度的关键在于排查尿酸、Vc等还原性物质对巯基的干扰。在阳性样本中对照试剂里的汞离子与尿液中的巯基结合，而无法和显色试剂反应，所以检测试剂要比对照试剂蓝色深从而判定阳性。一般的宫颈癌检测试剂中汞离子与巯基结合并不牢固，显色试剂的加入下汞离子可能与巯基分离从而影响结果的判定；本试剂中对照试剂里含有镉离子能够加速巯基与汞离子的结合并稳定，使检测结果更有可信性，大大减少假阴性的发生。

进一步的，所述含汞化合物包括氯化汞、硫酸汞、硝酸汞，含镉化合物与含汞化合物具有相同的阴性基团。

进一步的，所述含镉化合物包括氯化镉、硫酸镉、硝酸镉。具体选择的含汞化合物和含镉化合物都是可以作为汞离子、镉离子的来源，所对应的化合物和测试剂、显色试剂配合使用时，不会发生其他化学、物理反应，而引入杂质，从而影响检测结果。

进一步的，所述对照试剂中含汞化合物的浓度为0.04～0.08mol/L，含镉化合物的浓度为0.001mol/L。