[发明专利]一种齿瓣石斛的质量检测方法

说明书

本发明公开齿瓣石斛的质量检测方法，包括：1)以ITS‑26SE和ITS‑17SE为引物，进行测序，以鉴定待测石斛药材的品种；2)对样本容量为n的样本进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；3)对样本分别进行指纹图谱检测，获取齿瓣石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；4)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中的其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，通过Lasso方法筛选变量建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱模型。通过一代测序及特征指纹图谱，精确地鉴别和控制齿瓣石斛药材的质量。

技术领域

本发明属于中药成份检测分析领域，具体涉及一种齿瓣石斛的质量检测方法。

背景技术

齿瓣石斛(学名：Dendrobium devonianum Paxton)：茎下垂，稍肉质，细圆柱形，长50cm～70cm，直径0.3cm～0.5cm，不分枝，具多节，节间长2.5cm～4cm，干后常淡褐色带黑色。叶基部具抱茎的鞘，叶鞘常具紫红色斑点，干后纸质。总状花序常数个，生长在落叶的老茎上，每个花序具1朵～2朵花；花序柄绿色，长约0.4cm，基部具2枚～3枚干膜质的鞘；花苞片膜质，卵形，长约0.4cm，先端近锐尖；花梗和子房绿色带褐色，长2cm～2.5cm；花质地薄，开展，具香气；中萼片白色，上部具紫红色晕，卵状披针形，长约2.5cm，宽0.9cm，先端急尖，具5条紫色脉；侧萼片与中萼片同色，相似并等大，但基部稍歪斜；萼囊近球形，长约0.4cm；花瓣与萼片同色，相似并大小相等，先端近急尖，基部收狭为短爪，边缘具短流苏，具3条脉，两侧的的主脉多分枝；唇瓣白色，前部紫红色，中部以下两侧具紫红色条纹，近圆形，长3cm左右，基部收狭为短爪，边缘具复式流苏，上面密布短毛；唇瓣两侧各具一个黄色斑块；蕊柱白色，长约0.3cm，前面两侧具紫红色条纹；药帽白色，近圆锥形，顶端稍凹下，密布细乳突，前端边缘具不整齐的齿。

石斛一直被人们视为珍贵的中草药，具有十分重要的滋补功效。在临床上，石斛被用于治疗多种疾病，具有增强免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌症等药理功效。由于人为长期无节制采挖及不合理利用石斛，其野生资源日趋减少，市场上出现了一些以假乱真、以次充好的现象。此外，由于石斛品种较多，其品种间的杂交使得其近缘的种存在性状交叉现象，分类区别比较困难。因此，有必要建立石斛的特征指纹图谱对石斛的药材质量进行评价。

色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，作为一种全局分析的全景模式，反映的是样品的整体情况。但在色谱指纹图谱分析过程中，很多数据都是高维的，即数据包含很多属性或特征，比如有关齿瓣石斛色谱指纹图谱，就能更好地对齿瓣石斛进行描述，但在实际应用中对高维数据直接进行操作将会面临“维数灾难”的问题，“维数灾难”会导致建模过程所需要的样本数随着维数升高而呈指数级增长。面对高维数据，常规的最小二乘方法不再适用，为了提高模型的可解释性和预测的准确度，变量选择变得很重要。如何高效地从众多的变量中筛选出对因变量有重要作用的若干个变量，是在对指纹图谱进行分析时亟需解决的问题。

目前国家药典采用定量测定中药材中某一活性成分或有效成分即小分子成分的含量的高低来评价其质量。但研究证明，中药的疗效是来自其多种“活性成分”之间的协同作用，甚至是被普遍公认的有效的“活性成分”与“非活性成分”之间的协同作用或“生克作用”才能达到中药的疗效，而不是某一活性成分单独作用的结果。在中医理论指导下的中药，任何一种活性成分均不能全面反映中医用药所体现的整体疗效。

发明内容

本发明提供了一种齿瓣石斛的质量检测方法，通过一代测序鉴定石斛药材的品种，利用Lasso方法筛选变量建立齿瓣石斛中的化学小分子成分的相关特征指纹图谱模型，通过一代测序和相关特征指纹图谱模型准确评价齿瓣石斛的药材的质量。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种齿瓣石斛的质量检测方法，包括：

1)以ITS-26SE：5’GAATTCCCCGGTTCGCTCGCCGTTAC 3’；