[发明专利]β-1;3-葡聚糖、其制备方法以及制药用途

说明书

本发明公开了一种β‑1,3‑葡聚糖GPW1、其制备方法以及其在制备用于治疗阿尔兹海默症的药物中的用途。具体而言，所述β‑1,3‑葡聚糖GPW1通过以下方法制备：首先从赤灵芝孢子粉中提取粗多糖，再醇沉、最后经多种柱层析纯化得均一的β‑1,3‑葡聚糖。所述β‑1,3‑葡聚糖GPW1明显改善阿尔兹海默症小鼠学习和记忆能力，并且可促进神经干细胞生长，可用做治疗阿尔兹海默症的糖类药物。

技术领域

本发明涉及从中草药中提取多糖的技术领域，更具体而言，涉及一种β-1,3-葡聚糖、其制备方法及在治疗阿尔兹海默症中的应用。

背景技术

赤灵芝(Ganoderma lucidum)，别名红芝、木灵芝、万年蕈、灵芝草等，属于担子菌纲(Basidiomycetes)，多孔菌科(Polyparaceae)，灵芝属(Ganoderma)，是一种药、食两用高等真菌。赤灵芝主要含有三萜、多糖与多糖缀合物、甾醇及脂肪酸等成分，尤其是前两类，一般被认为是赤灵芝的主要活性物质，可作为赤灵芝的特征性化学成分。现代药理学研究表明，赤灵芝具有多种重要的功能，如抗肿瘤、抗炎、降血压、降血糖和镇静作用等，同时它还有扶正固本、强身健体和延缓衰老等保健功效。对赤灵芝孢子粉的初步研究表明，其中的多糖类成分可能是孢子粉的免疫调节、提高机体耐缺氧能力、镇静和抗炎等药理作用的物质基础。

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)亦称为早老性痴呆，是一种慢性进行性的神经退行性疾病，主要表现为渐进性的记忆能力下降，认知功能障碍以及失去生活独立自理能力。随着人口老龄化的不断加剧，AD的发病率也逐年升高，已成为最重要的公众关注健康问题之一。

研究表明灵芝来源多糖对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠脑组织有保护作用。晏涛等人(晏涛,陈世保,徐蕾,杨丽,陈龙菊，“灵芝多糖对阿尔茨海默病大鼠学习记忆和氧化应激的影响”，《陕西医学杂志》，第40卷第4期，第387-389页，2011年)通过向大鼠双侧海马注射Aβ1～40建立大鼠阿尔兹海默病模型，并研究灵芝多糖对AD大鼠的学习记忆能力和氧化应激的影响，结果显示，与模型组大鼠相比，经灵芝多糖治疗后，大鼠的认知能力有所提高，其机理可能是通过减少氧自由基的损伤从而提高AD大鼠学习记忆能力。裴钢等人之前也发现灵芝多糖粗糖给药能显著改善AD模型小鼠的学习记忆能力。然而由于灵芝多糖结构复杂且与分离手段相关，目前用于AD模型实验中的灵芝多糖其发挥功效的结构基础尚不明确，这在一定程度上影响了灵芝多糖进一步的开发利用。

因此，进一步阐明灵芝多糖治疗AD的物质基础，将会使灵芝多糖在营养保健、药物研发等方面得到更广泛的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵芝多糖，其可用于治疗阿尔茨海默症，并公开了其制备方法和用途。

一方面，本发明提供一种β-1,3-葡聚糖GPW1，其结构式如下：

其中，n＝5～100，所述β-1,3-葡聚糖GPW1的重均分子量范围为5-100kDa，优选为10-80kDa，更优选为10-40kDa。

另一方面，本发明提供所述β-1,3-葡聚糖GPW1的制备方法，其包括以下步骤：

a.多糖提取：干燥的赤灵芝孢子粉经乙醇脱脂、水提，过滤并将所得滤液浓缩，透析，浓缩，醇沉，离心，洗涤，真空干燥得水提赤灵芝孢子粉粗多糖；以及

b.多糖纯化：将步骤a中制备的所述赤灵芝孢子粉粗多糖先用DEAE纤维素阴离子柱进行初步分级，水洗脱得中性多糖组分，进而用S300凝胶色谱柱纯化，得到所述β-1,3-葡聚糖。

更具体地，本发明提供了一种从赤灵芝孢子粉中提取β-1,3-葡聚糖的方法，该方法包括以下步骤：