[发明专利]一种通过控制LsFT基因来培育耐抽薹型生菜的方法在审

专利信息
申请号: 201710059850.2 申请日: 2017-01-24
公开(公告)号: CN106754970A 公开(公告)日: 2017-05-31
发明(设计)人: 王倩;陈子敬;韩莹琰 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100083 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 通过 控制 lsft 基因 培育 耐抽薹型 生菜 方法
【权利要求书】:

1.一种通过控制LsFT基因来调节生菜抽薹开花起始时间的方法,其特征在于,所述LsFT基因具有SEQ ID NO.27所示的编码序列。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述控制LsFT基因为抑制LsFT基因的功能,并且所述调节生菜抽薹开花起始时间为延迟生菜抽薹开花起始时间。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述抑制LsFT基因的功能通过LsFT基因的转录抑制或者转录后抑制来实现;优选的是,所述抑制LsFT基因的功能通过基因敲除或者基因沉默的方式实现;更优选的是,所述抑制LsFT基因的功能通过LsFT-RNAi技术来实现。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,LsFT-RNAi技术使用的LsFT-RNAi载体选用5'末端AscⅠ位点、3'末端SwaⅠ位点、5'末端BamHⅠ位点和3'末端SpeⅠ位点构建得到。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述LsFT-RNAi载体借助农杆菌通过子叶转染法浸染生菜子叶来导入。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法采用包括种子培养基、共培养培养基、分化培养基、生芽培养基、和生根培养基的遗传转化培养基体系进行,其中:

所述种子培养基包含4.44g/L的MS粉,30g/L的蔗糖和6.8g/L的琼脂;

所述共培养培养基包含4.44g/L的MS粉、30g/L的蔗糖,6.8g/L的琼脂,0.1mg/L的6-BA和0.1mg/L的NAA;

所述分化培养基包含4.44g/L的MS粉,30g/L的蔗糖,6.8g/L的琼脂,0.1至0.2mg/L的6-BA,0.1mg/L的NAA和300mg/L的头孢霉素;

所述生芽培养基包含2.22g/LMS粉,15g/L的蔗糖,2.22g/L的植物凝胶和300mg/L的头孢霉素;和/或

所述生根培养基包含2.22g/L的MS粉,15g/L的蔗糖,6.8g/L的琼脂和300mg/L的头孢霉素。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述种子培养基、共培养培养基、分化培养基、生芽培养基和生根培养基pH各自独立地为6.5至6.8。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

(1)将生菜种子在30%次氯酸钠溶液里消毒5分钟,然后播种在所述种子培养基上;

(2)在播种后第6天时,切下幼苗子叶划伤并放入含有农杆菌的1/2MS液体培养基里侵染13分钟,然后将子叶放到所述共培养培养基中在28℃黑暗培养2天,所述农杆菌导入有LsFT-RNAi载体并且所述1/2MS液体培养基的OD600nm值为0.2–0.3;

(3)将在共培养培养基培养后的的子叶移到分化培养基培养1至2周内从而在愈伤组织上长出芽体;

(4)将芽体切下并移植到生芽培养基中培养2周;

(5)将在生芽培养基中培养后的芽体转移到生根培养基中培养直至得到根长达到5至8cm的幼苗;

(6)将幼苗转入带有培养土的种植容器中驯化培养2周的时间,然后移栽至土壤中直至收获。

9.LsFT基因在提前植物生殖生长发生时间中的应用,所述LsFT基因具有SEQ ID NO.27所示的编码序列,并且所述提前植物生殖生长发生时间通过增强LsFT基因的功能来实现。

10.LsFT基因在延迟植物生殖生长发生时间中的应用,所述LsFT基因具有SEQ ID NO.27所示的编码序列,并且所述延迟植物生殖生长发生时间通过抑制LsFT基因的功能来实现。

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