[发明专利]一种利用生物柴油副产物粗甘油进行高附加值转化获得SA的方法

权利要求书

1.一种利用生物柴油副产物粗甘油进行高附加值转化获得SA的方法，其特征在于，包括如下步骤：

a、副产物粗甘油的预处理：

将制备得到的生物柴油粗品静止分层，上层为柴油、下层为副产物粗甘油；

首先将粗甘油与蒸馏水按体积比1:2～4混匀，以降低粗甘油的粘性；然后用酸调节pH至3～5，使粗甘油中的皂化物转变为游离脂肪酸，静置分层，使游离脂肪酸从粗甘油中分离出来；再对粗甘油进行40～80℃真空蒸发，除去易挥发性杂质；最后再加入活性炭进行吸附脱色并除杂；

b、发酵培养基的配置：

以预处理后的粗甘油作为碳源，加入含铵根离子的氮源，再加入餐厨废水，使碳源和氮源的质量比为1:1～3:1、甘油含量在10～30g/L；再加入IPTG，使IPTG的质量浓度在1～3％；最后调pH至7.0、高温灭菌，获得发酵培养基；

c、种子液制备：首先将活化大肠杆菌基因工程菌接种到LB固体培养基上，培养6～12h；然后再接种到LB液体培养基上，继续培养6～12h，得到二级种子液；

d、发酵：将二级种子液按照3％～15％的接种量接种到5L步骤b获得的发酵培养基中，溶氧保持在20％以上，搅拌，维持发酵温度为35～40℃，进行连续发酵；

e、待底料耗完后，开始补料，保持pH在6.0～7.0，继续培养60～80h，发酵结束，得产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的氮源为氨水或硫酸铵。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b中所述的餐厨废水含有钠盐和钾盐，在加入IPTG之前，先调整钾盐含量在3～4g/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤c中所述的大肠杆菌基因工程菌为专利ZL 201310600843.0中构建的大肠杆菌工程菌。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤e中所述的补料是补入碳源和氮源，所述的碳源为预处理后的粗甘油，所述的氮源为氨水或硫酸铵；碳源的补料速度在300～500g/L.h；在补入碳源的同时补入氮源至pH在6.0～7.0。