[发明专利]一种替考拉宁的提纯方法

说明书

本发明提供一种替考拉宁的提纯方法，该提纯方法该方法是将替考拉宁发酵液依次进行树脂富集、树脂纯化、膜浓缩、喷雾干燥操作。本发明的方法与现有技术相比，极性大孔吸附树脂与粒径均一的中等极性层析树脂结合使用，产品收率高，脱色效果好；喷雾干燥技术，避免了丙酮的大量使用，不仅仅保护了环境，降低成本，更避开了现有技术中有机溶剂的残留问题；通过本发明纯化方法得到的替考拉宁各组分比例符合EP标准，提纯工艺高效便捷、制备量大，适于工业化生产。

【技术领域】

本发明属于制药工程领域，具体涉及一种替考拉宁的提纯方法。

【背景技术】

替考拉宁(teicoplanin)是继万古霉素之后开发的另一种抗耐药菌的糖肽类抗生素。现有替考拉宁生产方法中，一般采用微生物发酵生产替考拉宁为主，发酵液中替考拉宁，包括TAl～TA2，其中TA2是替考拉宁的主要活性成分，主要由5个化学结构十分相似的化合物(TA2-1，TA2-2，TA2-3，TA2-4，TA2-5)组成；其粗品及精制品中还含有一个活性组分TA3-1，该化合物是TA2的去酰基葡萄糖胺产物；此外，其中还含有2个亲脂性较强的类似物。替考拉宁化学结构如下式一所示。目前，制药领域遵循的标准中，《欧洲药典》(EP)对各个组分做出了明确的规定，A2组之和不小于80.0％，其中A2-2为35.0％～55.0％，A2-1、A2-3、A2-4、A2-5均不大于20.0％，A3-1不大于15.0％，不纯组分不大于5.0％。

现有替考拉宁主要的提纯方法有：溶媒萃取法、吸附法、离子交换法和色谱层析法等。溶媒萃取法分离纯化效果差，收率低，目前该法很少采用；文献[参照M.R.巴尔顿(M.R,Bardon)等的Journal of Antibiotics，第31卷，第3号，第170-177页(1978年3月)]表述离子交换法对替考拉宁提纯的影响，强酸性离子交换树脂会使替考拉宁的部分糖成分发生分解，应用强碱性离子交换树脂，会使替考拉宁发生差向异构化，生物学活性降低；公开号为CN101302248A的中国专利、公开号为US2005245481A1的美国专利均公开了液相层析法提纯替考拉宁，但这些专利所公开的提纯方法对于A2各组分比例不能很好的控制，不能达到欧洲药典的标准，且提纯时间长，生产周期长。申请号为CN201210221636.X的中国专利公开了一种利用纳米聚合物微球制备替考拉宁精粉的方法，该方法部分实现了产品中单组份的含量可控；然而，纳米聚合物微球成本较高，难以大规模推广。此外，中国专利申请号为CN200710107185.6公开了一种采用GE公司的葡聚糖凝胶或琼脂糖类凝胶层析制备高纯度替考拉宁的生产方法，但因葡聚糖凝胶和琼脂糖类凝胶价格昂贵，并不适合工业化生产。

因此，现有替考拉宁的提纯方法中，比较成熟与常用的还是树脂吸附法；其将发酵液碱化后过滤，滤液经树脂吸附后，用解吸剂对树脂进行解吸，解吸液经过活性炭脱色，然后滤液加溶剂沉淀，过滤即得替考拉宁湿品，最后用树脂或层析剂进行进一步精制，其中的树脂主要为大孔吸附树脂，解吸剂为有机溶剂的水溶液，最后加大量的溶剂进行沉淀。

上述树脂吸附法在具体的工业生产中虽然已经得到较为充分的认可，但也存在着如下的缺陷：第一目前树脂吸附法所采用的树脂大多为非极性大孔吸附树脂，其对替考拉宁各组分比例的控制影响较大，脱色去杂效果不尽理想；第二就是最后的沉淀操作，通常采用加入丙酮，至90％丙酮浓度，析出替考拉宁，这样需要用到大量的丙酮，大大地加重环保的压力，又影响生产环境和人员健康。

有鉴于此，研究出一种能够适合工业化生产、并对环境友好的提纯替考拉宁的树脂吸附法是从业人员所迫切希望地。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题在于提供一种替考拉宁的提纯方法，不仅对环境友好，而且能够适合工业化生产。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：一种替考拉宁的提纯方法，该提纯方法具体包括如下操作步骤：