[发明专利]一种葵花籽粕复合多肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及油料饼粕深加工技术领域，具体涉及一种葵花籽粕复合多肽的制备方法。

背景技术

向日葵是世界四大油料作物(大豆、向日葵、油菜和花生)之一，也是我国的主要油料作物之一。葵花籽榨取油脂后的籽粕中蛋白含量为30％～50％，脂肪含量为1％～8％，灰分为5％～10％。其中葵花籽粕(饼粕)蛋白因其氨基酸含量丰富且平衡良好、生物利用率高和无抗营养因子而被作为植物蛋白的重要来源。

饼粕蛋白经酸碱或酶水解后可得到活性多肽，现代营养学研究发现，蛋白质水解后以短肽(2～7个氨基酸)形式被机体直接消化吸收的比例远大于以游离氨基酸形式，而且吸收更快。肽的吸收主要是由依赖H⁺浓度或Ca²⁺浓度的主动转运过程、具有pH依赖性的非耗能性Na⁺/H⁺交换系统以及谷胱甘肽转运系统完成的，且短肽的直接吸收可避免氨基酸之间的竞争吸收，效率更高，利于机体中不同组织和器官的利用。即短肽的生物效价和营养价值比氨基酸更高。研究发现饼粕多肽在抗氧化、降血压、抗肿瘤、增强免疫及降血脂等方面有较高的生物活性。

在制备复合多肽工艺过程中，因肽键的断裂，氨基和羧基发生质子交换，产生了大量的H⁺，为了维护水解体系pH稳定，确保酶的较高工作效率，现有技术通过外加碱液(常用NaOH、KOH)或缓冲液(如磷酸缓冲液等)进行调节，大大增加了酶解产物的灰分含量。这些物质的存在不仅降低了产物纯度，还可能危害人体健康。科学研究发现高钠盐的摄入会使钠泵抑制因子释放增加，被大量吸收进入血液，使肾脏对钠和水的重吸收减少，造成钠和水滞留，从而使血容量增加及刺激血管壁收缩，严重时可引发高血压。高钾盐的摄入可引起血钾过高，主要表现极度倦怠、肌肉无力、嗜睡、心率减慢或心脏停搏等。故在制备复合多肽时须进行脱盐精制处理。

目前常用的脱盐手段包括离子交换树脂、大孔树脂脱盐法，葡聚糖凝胶柱脱盐法，超滤、纳滤膜分离法等。这些方法操作比较繁琐而且肽的回收率较低，应用不够方便。因此，有必要研发一种新型高效、环保的多肽制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，通过控制酶解过程中的加碱量，利用双酶组合分步水解，工艺简单，易于操作，生产成本低，可大大减少多肽产物灰分含量，无需脱盐处理即可制得符合国标的多肽。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种葵花籽粕复合多肽的制备方法，包括如下步骤：

1)原料处理：将原料葵花籽粕粉碎后，按质量比为1:9～11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸馏水，调pH值为3.5～4.5，在沸水中加热搅拌3～8min，离心分离，收集沉淀物，得到湿热处理物；

2)一次酶解：按质量比为1:9～11的料液比加入湿热处理物和蒸馏水，调pH值，添加2～4wt％外切蛋白酶，55～65℃下酶解2h，灭酶，冷却；

3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5～3.5wt％内切蛋白酶，50～60℃下酶解1.5～2.5h，灭酶，离心分离，取上清液，即酶解液；

4)浓缩：采用减压真空浓缩方式将酶解液浓缩至原体积的1/3；

5)喷雾干燥：在进样速率为16～20mL/min、进风口温度为100～130℃、风速频率为26～28的条件下干燥，即得成品。

根据以上方案，所述原料处理时的离心分离采用布袋式离心机、干燥采用冷风干燥机。

根据以上方案，所述一次酶解时采用NaOH溶液调节pH值为6.0～8.0，所述NaOH溶液的浓度为1.0～1.5mol/L。

根据以上方案，所述外切蛋白酶为碱性蛋白酶。

根据以上方案，所述内切蛋白酶包括复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或风味蛋白酶中的任意一种或一种以上的混合物。

根据以上方案，所述减压真空浓缩采用旋转蒸发器。

本发明的有益效果是：

1)本发明以葵花籽榨油后的副产物即葵花籽粕为原料制备复合多肽，充分发挥其功能性和经济价值，对促进油料加工副产物的增值利用具有重要意义；

2)本发明采用低pH值与双酶分步酶解，一方面避免了常用高pH值单酶酶解造成的产物高盐问题，后期不需分离盐；另一方面，酶解过程中采用外切酶和内切酶相结合，分别作用于蛋白外部和内部的肽键，有利于多肽的产生，确保了产物中多肽的含量和提取率，既缩短了生产周期，又降低了生产成本；

3)本发明的工艺简单，易于操作，“三废”排放量少，适合工业化生产。