[发明专利]一种尿液中肿瘤标志物5‑羟吲哚乙酸的检测试剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生化检测技术领域，具体为一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂及其制备方法。

背景技术

据2014年世界卫生组织报告指出：中国新增癌症病例居全球之首，新诊断癌症例数为307万，占全球总数的21.8％。癌症死亡人数约220万，占到全球癌症死亡人数的26.9％。在所有疾病中癌症的死亡率更是占据首位，是人类健康的第一杀手。

肿瘤的发展分为5个阶段：良性、肿瘤细胞启动期、肿瘤早期、肿瘤中期、晚期。实际上，在肿瘤发展的前4个阶段早期发现、早期治疗，都是可以完全治愈的，在前三个阶段发现并治疗，治愈率可达100％。而癌症的可怕之处在于在前三个阶段，寻常的临床手段根本无法检测出来，即便是到了中晚期，也只有非常专业的医生通过较为先进的设备才能检测出。最新的技术为采用化学方法，例如公开号为CN104390975A专利公开的技术方案，对尿液中肿瘤的标志物5-羟吲哚乙酸进行检测，根据显色即可判断出是否患癌，但是，该技术存在反应速度慢的特点，尤其是在20℃以下需要水浴加热或者延长反应时间，并且该专利公开的检测化学物在尿液中5-羟吲哚乙酸浓度低时显色并不明显，所以，现有技术存在的缺陷为在肿瘤细胞前期，尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸浓度低时不易检测，温度限制检测反应速度慢，并不能真正实现广谱性。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂及其制备方法，实现的目的为增强检测试剂的灵敏度，打破温度对反应速度的限制，对5-羟吲哚乙酸有较高的特异性，即使在肿瘤前期5-羟吲哚乙酸浓度低时也能够检测到，广谱性强。

为了实现上述目的，本发明公开的技术方案为：本发明提供的一种尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸的检测试剂，组成该检测试剂的成分包括硫酸汞、硝酸亚汞、硝酸镍。选择所述三种成份组成检测试剂，能够增强试剂的抗干扰性。

进一步的，本发明组成该检测试剂的成分还包括1-亚硝基-2-萘酚。本试剂的1-亚硝基-2-萘酚可与5-羟吲哚乙酸偶联呈紫色，颜色的深浅与尿液中5-羟吲哚乙酸含量呈正比，在5-羟吲哚乙酸极低的浓度(30mg/L左右)下人眼即可分辨出来；现有技术中的试剂一般都是根据亚汞离子与5-羟吲哚乙酸生成红色来判定，当意识颜色变化时5-羟吲哚乙酸浓度已经为150mg/L以上，因此在5-羟吲哚乙酸150mg/L以下无法做出有效判定，所以，本发明的检索试剂具有更强的灵敏度，广谱性强。

优选的，组成该检测试剂的各成份在检测试剂中的浓度分别为，硫酸汞0.15～0.39g/ml，硝酸亚汞0.05～0.31g/ml，硝酸镍7.9～64mg/ml。

优选的，1-亚硝基-2-萘酚在检测试剂中的浓度为0.06～0.20g/ml。

本发明还公开了制备上述检测试剂的方法，(1)A溶液的制备：称取硫酸汞溶于硫酸溶液中获得A溶液；

(2)B溶液的制备：称取硝酸亚汞溶于硝酸溶液中获得B溶液；

(3)C溶液的制备：称取硝酸镍溶于纯化水中获得C溶液；

(4)将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C溶液混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。制备方法简单，简单混合即可得到检测试剂，成本低廉、易于规模化生产。

优选的，所述步骤(1)中硫酸溶液的浓度为3mol/L；所述步骤(2)中硝酸溶液的浓度为4mol/L。

优选的，所述步骤(4)中A、B、C溶液按照的1∶1.1～1.8∶0.3～0.7体积比混合。在此体积比下试剂的显色效果最好，成本低。

进一步的，当组成检测试剂的成分还包括1-亚硝基-2-萘酚时，所述步骤(3)中还包括D溶液的制备：称取1-亚硝基-2-萘酚溶于质量浓度为5％的乙酸溶液中获得D溶液。

优选的，所述步骤(4)中还包括将步骤(1)～(3)制备得到的A、B、C、D溶液按1∶1.1～1.8∶0.3～0.7∶1.1～1.5体积比混合，即得所述尿液中肿瘤标志物5-羟吲哚乙酸检测试剂。

进一步的，所述步骤(1)中A溶液的浓度为0.15～0.39g/ml；所述步骤(2)B溶液的浓度为0.05～0.31g/ml；所述步骤(3)中C溶液的浓度为7.9～64mg/ml。

进一步的，所述步骤(3)中D溶液的浓度为0.06～0.20g/ml。