[发明专利]提纯纽莫康定B0的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物化学领域，涉及纽莫康定B₀的工业化生产，具体涉及一种提纯纽莫康定B₀的工业化方法。

背景技术

纽莫康定B₀是由霉菌Glarea lozoyensis发酵合成的次级代谢产物。Glarea lozoyensis发酵产物除目标产物之外，有C₀等组份，还包括有大量的色素等其他杂质，因此纽莫康定B₀的提取纯化工艺难度较大。

纽莫康定B₀ Cas：135575-42-7

纽莫康定C₀ Cas：144074-96-4

中国发明专利200910133118.0公开了制备纽莫康定B₀的方法，主要步骤是：a)离心纽莫康定B₀发酵液，取菌丝体，用甲醇浸提纽莫康定B₀；b)降甲醇浸提液蒸干，再用正丁醇浸提纽莫康定B₀；c)将正丁醇浸提液蒸干，再用70～80％甲醇浸提纽莫康定B₀，过酸性氧化铝柱，收集流出液；d)将纽莫康定B₀收集蒸干后，用60～70％甲醇溶解，上HP20吸附树脂，用85～95％甲醇洗脱，收集洗脱液纽莫康定B₀纯度在50～65％间；e)将纽莫康定B₀收集液蒸干，溶于反相树脂YPR-II，用85～95％甲醇洗脱，收集纽莫康定B₀纯度大于90％；f)将纽莫康定B₀收集液蒸干后，用甲醇溶解，滴加少量水使之过饱和结晶析出，制得纽莫康定B₀，纯度可达到96％。

中国发明专利201110266790.4公开了一种纽莫康定B₀的提取纯化方法，主要包括：a)将含有纽莫康定B₀的发酵液pH值调至2.0～4.0，过滤，菌渣用低分子醇浸提，得浸提液；b)调整浸提液的醇浓度至30～50％(V/V),pH为6.0～8.0；c)用吸附树脂吸附浸提液后，依次用水、30～50％(V/V)丙酮-水溶液冲洗树脂，然后用pH值为3.0～5.0的50％～80％(V/V)丙酮-酸溶液洗脱树脂，收集富含纽莫康定B₀的洗脱液；d)纽莫康定B₀洗脱液加水稀释至丙酮浓度为30～50％(V/V),用吸附树脂吸附，用水冲洗树脂后用低分子醇洗脱，收集富含纽莫康定B₀的洗脱液；e)以常规方法结晶得纽莫康定B₀。

现有技术主要采用的是树脂柱工艺，均未对相关物质C₀的检测和控制进行描述，C₀是纽莫康定B₀的异构体，在结构上的差异表现为一个羟基位置的不同；C₀杂质不能在反相色谱中与纽莫康定B₀分离，只有通过正相色谱分离。发酵液中的C₀杂质一般10％，如果不能得到有效的控制，最后得到的是纽莫康定B₀和C₀的混合物。C₀杂质能参与后续反应，严重影响醋酸卡泊芬净的质量。

中国发明专利201410051009.5公开了一种提纯纽莫康定B₀的新方法，通过该方法，能够有效的控制C₀的含量，降到C₀≤0.2％。该方法为本申请人公司母公司下属的子公司博瑞生物医药泰兴市有限公司开发，但在进行工艺交接时，本发明人发现该方法虽然能够有效的控制C₀的含量，使得纽莫康定B₀的纯度能够达到99％以上，但在整个工艺中，需要柱层析，柱层析应用于工业化生产时，费时，溶剂使用量大，易造成环境污染，且原料损耗大，使得生产成本大幅提高。

发明内容

为克服中国发明专利201410051009.5所公开的提纯纽莫康定B₀的方法的缺点，本发明人优化了该提纯工艺。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种提纯纽莫康定B₀的方法，包括以下步骤：

(1)将含有纽莫康定B₀的发酵液pH调至2.0～4.0，过滤，菌渣用低分子醇浸提，得浸提液；