[发明专利]一种喉癌细胞的核酸适配体及试剂盒

权利要求书

1.一种能特异性结合人喉癌细胞的核酸适配体，其特征在于序列如SEQ ID NO：1或SEQID NO：2所示。

2.如权利要求1所述的核酸适配体，其中所述喉癌细胞为Hep-2细胞。

3.一种喉癌的诊断试剂盒，其包含权利要求1-2任一项所述的核酸适配体。

4.如权利要求1-2任一项所述的核酸适配体在制备用于检测喉癌细胞的试剂中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其中检测喉癌细胞的试剂为用于喉癌组织切片中喉癌细胞成像的试剂。

6.如权利要求4-5任一项所述的应用，所述喉癌细胞为Hep-2细胞。

7.如权利要求1-2任一项所述的核酸适配体在制备治疗靶向喉癌的药物中的应用，所述适配体作为抗肿瘤药物的载体使用。

8.如权利要求1-2任一项所述的核酸适配体在制备喉癌的肿瘤标志物中的应用。

9.一种鉴定权利要求1所述的特异性结合人喉癌细胞的核酸适配体的方法，包括如下步骤：

(1)合成以下序列所示的随机单链DNA文库和引物：

随机文库：5’-ACAATGATCGAGTCGAGCAC(40N)CTGCTTGCCTCATCCGTCCA-3’；

上游引物：5’-FAM-ACAATGATCGAGTCGAGCAC-3’；

下游引物：5’-Biotin-TGGACGGATGAGGCAAGCAG-3’；

(2)SELEX筛选特异核酸适体文库：

(3)PCR扩增文库；

(4)DNA单链文库的制备；

(5)反向筛选：以鼻咽癌细胞5-8F为对照，进行反向筛选；

(6)正向筛选；

(7)多轮筛选：将步骤6得到的DNA单链文库替代步骤4中的DNA单链文库，重复上述步骤5-6的操作；最终得到富集度高的序列，即为用于检测人喉癌细胞株Hep-2的核酸适配体。