[发明专利]胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗

说明书

本发明提供胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗，属于微生物学和免疫学领域。胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗，含有胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株菌影。本发明胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗，不仅能够完全保护同一血清型胸膜肺炎放线杆菌的攻击，而且能够对其它血清型提供良好的交叉免疫保护，显著降低了疫苗防疫成本。

技术领域

本发明属于微生物学和免疫学领域，具体涉及胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗。

背景技术

猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)引起的一种高度传染性、致死性的呼吸道疾病。该病原菌血清型较多，可感染各年龄段猪，且分布范围广，给养猪业带来了极大的经济损失。

现有技术中，每种血清型的APP灭活疫苗只能保护同一血清型的APP菌株攻击，显著提高了疫苗防疫成本。

发明内容

本发明的目的是提供一种胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗，不仅能够完全保护同一血清型胸膜肺炎放线杆菌的攻击，而且能够对其它血清型提供良好的交叉免疫保护，显著降低了疫苗防疫成本。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗，含有胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株菌影。

在本发明中，所述疫苗中的菌数至少为1×10⁹CFU/mL。

在本发明中，所述疫苗是将菌影悬浮液与矿物油按照体积比为1:2.5-3.5混合、乳化后获得的。

在本发明中，所述菌影是将胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株采用NaOH处理后得到。

优选的技术方案中，NaOH处理时的温度为30-40℃。

优选的技术方案中，所述菌影采用如下方法制备：将培养12-24h的胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株采用缓冲液悬浮，得到浓度为1×10⁸CFU/mL～1×10⁹CFU/mL的活菌悬浮液；在所述活菌悬浮液中加入2-4mg/ml的NaOH溶液处理40-80min，离心取沉淀，得到菌影；所述活菌悬浮液与NaOH溶液的体积比为1:1。

优选的技术方案中，所述菌影采用如下方法制备：将培养24-72h的胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株采用缓冲液悬浮，得到浓度为1×10⁸CFU/mL～1×10⁹CFU/mL的活菌悬浮液；在所述活菌悬浮液中加入3.5-6.5mg/ml的NaOH溶液处理55-80min，离心取沉淀，得到菌影；所述活菌悬浮液与NaOH溶液的体积比为1:1。

优选的技术方案中，培养48-72h的胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株采用4.5-6.5mg/ml的NaOH溶液处理；培养24-48h的胸膜肺炎放线杆菌血清1型Shope株采用3.5-5.5mg/ml的NaOH溶液处理。

有益效果：本发明胸膜肺炎放线杆菌菌影疫苗具有良好的免疫保护效力，可以刺激机体产生高滴度的抗体，不仅能完全保护同一血清型菌株的攻击，而且能够对其它血清型提供良好的交叉免疫保护，显著降低了防疫成本。本发明利用单一的化学试剂替代传统方法来制备胸膜肺炎放线杆菌菌影，提供了一种新的胸膜肺炎放线杆菌菌影制备方法，取得了良好的效果，并且操作简单、快速而高效，显著降低了生产成本。

附图说明

图1最小抑菌浓度的NaOH溶液不同处理时间对培养12h菌液裂解率的影响。

图2最小抑菌浓度的NaOH溶液不同处理时间对培养24h菌液裂解率的影响。