[发明专利]用于鉴定仓储粉盗的引物对、试剂盒及方法有效
申请号: | 201710048153.7 | 申请日: | 2017-01-21 |
公开(公告)号: | CN106701971B | 公开(公告)日: | 2020-10-13 |
发明(设计)人: | 鲁玉杰;赵亚茹;王争艳;彭华;刘凤杰;苗世远;张晨光 | 申请(专利权)人: | 河南工业大学;河南省环境监测中心 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州华隆知识产权代理事务所(普通合伙) 41144 | 代理人: | 经智勇 |
地址: | 450000 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 仓储 引物 试剂盒 方法 | ||
1.用于鉴定仓储粉盗的引物对,其特征在于,所述引物对为:
由SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的序列组成的引物对;或,
由SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的序列组成的引物对;或
由SEQ ID No:5和SEQ ID No:6所示的序列组成的引物对;
鉴定的仓储粉盗为小粉盗、姬粉盗、亚扁粉盗中的至少一种;
其中,由SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的序列组成的引物对特异于小粉盗;由SEQID No:3和SEQ ID No:4所示的序列组成的引物对特异于姬粉盗;由SEQ ID No:5和SEQ IDNo:6所示的序列组成的引物对特异于亚扁粉盗。
2.一种鉴定仓储粉盗的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的引物对中的至少一种,且组成每个引物对的两条单链DNA的摩尔数相等。
3.根据权利要求2所述的鉴定仓储粉盗的试剂盒,其特征在于,包括:分别单独包装的SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的序列的单链DNA;
或,分别单独包装的SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的序列的单链DNA;
或,分别单独包装的SEQ ID No:5和SEQ ID No:6所示的序列的单链DNA;
还包括下述物质中的至少一种:PCR反应缓冲液、DNA聚合酶、4种dNTP。
4.一种鉴定仓储粉盗的方法,其特征在于,包括步骤:
S1:以待测仓储粉盗的基因组DNA为模板,用权利要求1中的任一对引物对进行PCR扩增;
S2:检测PCR扩增产物,根据PCR扩增产物的大小确定待测仓储粉盗类型;
若PCR扩增产物中含有272bp的片段,则待测仓储粉盗为或候选为小粉盗;反之,则待测仓储粉盗不为或候选不为小粉盗;
若PCR扩增产物中含有285bp的片段,则待测仓储粉盗为或候选为姬粉盗;反之,则待测仓储粉盗不为或候选不为姬粉盗;
若PCR扩增产物中含有427bp的片段,则待测仓储粉盗为或候选为亚扁粉盗;反之,则待测仓储粉盗不为或候选不为亚扁粉盗。
5.根据权利要求4所述的鉴定仓储粉盗的方法,其特征在于,所述PCR扩增的退火温度为58℃。
6.根据权利要求4所述的鉴定仓储粉盗的方法,其特征在于,组成每个引物对的两条单链DNA在PCR反应体系中的摩尔比均为1:1。
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