[发明专利]一种基于手性定量分析技术的红茶产地判别方法

权利要求书

1.一种基于手性定量分析技术的红茶产地判别方法，其特征包括以下步骤：

1）不同产地红茶中手性萜类化合物的含量测定

收集各不少于5个的不同产地的红茶样品，采用手性气相色谱-质谱联用技术，分离芳樟醇、四种芳樟醇氧化物、4-萜品醇、α-松油醇、柠檬烯及α-紫罗兰酮的相应对映异构体，建立各萜类化合物对映异构体浓度与定量离子峰面积间的线性方程；根据茶叶产地对茶叶进行分组，依次按列发布所获得的萜类化合物对映异构体含量，导入EXCEL电子表格中，所述四种芳樟醇氧化物为芳樟醇氧化物A、B、C和D；

所述手性气相色谱-质谱联用分析方法中：气相条件：CP7500CP-Cyclodextrin为手性色谱柱；进样口温度为220 ºC，传输线温度为250 ºC；进样量为1.0 μL，分流进样，分流比为10:1；载气为高纯度氦气：纯度≥99.99％，流速为1.2 mL/min；柱温箱采用程序升温：50 ºC保持2 min，然后以2 ºC/min升到150 ºC保持10 min，再以4 ºC/min升到180 ºC保持5 min；

2）不同产地红茶的PLS-DA模型的建立及验证

将萜类化合物对映异构体的含量数据导入Simca-p 11.5软件，选择校正集样本，以萜类化合物含量矩阵为自变量，产地分类信息为观察变量，建立校正集的偏最小二乘法判别分析PLS-DA模型；对已建立的PLS-DA模型进行置换检验试验，验证模型是否存在“过拟合”现象；将验证集里的茶叶样品代入到PLS-DA模型中，检验其判别准确率；

3）未知红茶样品的产地预测

依照步骤1）对未知产地的红茶样品中手性萜类化合物进行定量分析，将数据导入已建立的PLS-DA预测模型中，依照步骤2）代入已建立的红茶产地判别模型中，计算该茶样在每个Class中的分类变量值Y_predict，当某Class中的Y_predict＞0.5，且偏差＜0.5，则判定该红茶属于该Class对应的产地。

2.根据权利要求1所述的一种基于手性定量分析技术的红茶产地判别方法，其特征在于所述步骤1）具体包括以下步骤：

a）手性萜类化合物的定量工作曲线绘制

采用手性气相色谱-质谱联用技术分离芳樟醇、四种芳樟醇氧化物、4-萜品醇、α-松油醇、柠檬烯及α-紫罗兰酮挥发性萜类化合物标准品的相应对映异构体，记录每个化合物的保留时间、特征峰离子及定量离子；配置一系列不同浓度梯度的上述化合物的混合溶液，分别取10 μL于已预处理过的空白茶样中，顶空固相微萃取法结合手性气质联用技术分析空白茶样中挥发出的混合标准品；建立各萜类化合物对映异构体浓度与定量离子峰面积间的线性方程，从而绘制出芳樟醇、四种芳樟醇氧化物、4-萜品醇、α-松油醇、柠檬烯及α-紫罗兰酮对映异构体的定量工作曲线；

b）不同产地中红茶样品中手性萜类化合物的含量测定

采用与步骤a）相同的顶空固相微萃取条件萃取不同产地红茶的香气成分，依照与步骤a）相同的GC-MS方法分析红茶中的香气成分；利用步骤a）中记录的特征峰离子及保留时间定性出不同茶叶中含有的目标萜类化合物对映异构体，并记录其定量离子峰面积；将峰面积分别代入到步骤a）建立的工作曲线，从而计算出芳樟醇、四种芳樟醇氧化物、α-松油醇、4-萜品醇、柠檬烯及α-紫罗兰酮对映异构体在不同产地红茶中的含量；将获得的数据按产地分类导入EXCEL表；上述四种芳樟醇氧化物为芳樟醇氧化物A、B、C和D。