[发明专利]一种菠萝蛋白酶的提取方法

权利要求书

1.一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于以下步骤：

1）预处理：将新鲜菠萝或菠萝茎清洗，预冷处理，粉碎，榨汁；

2）酶解：在带有果肉的菠萝汁中加入蒸馏水、木质素酶和稳定剂，酶解结束后灭酶，加入纤维素酶和果胶酶，酶解，酶解结束后灭酶，过滤；

3）等电点沉淀：调节滤液pH值，搅拌，静置，过滤；

4）超滤：沉淀中加入蒸馏水，超滤；

5）干燥保存：将滞留液旋蒸浓缩，冷冻干燥，研磨，加入稳定剂，搅拌，得到菠萝蛋白酶。

2.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤1中预冷处理的温度为0~2℃，预冷时间为21~25h。

3.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤2中带有果肉的菠萝汁：蒸馏水质量比为1:6~10。

4.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤2中木质素酶加入量为0.2~0.4%，pH为3.5~4.2，温度为38~43℃，酶解时间为3~3.4h；纤维素酶和果胶酶的加入量分别为0.3~0.5%和0.1~0.2%，酶解温度为53~56℃，pH为2.7~3.2，酶解时间为2.0~2.3h。

5.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤2和步骤5中稳定剂成份及其重量份为：10~20份B-1稳定剂、0.004~0.005份茄红素、2~5份EDTA、0.002~0.005份偏亚硫酸和0.001~0.003份叶酸。

6.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤3中用氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸氢钾中的一种或多种调节溶液pH为9.5~9.6。

7.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤4中先用6~8kDa的超滤膜超滤，取滤过液，再用0.9~1.2kDa的超滤膜超滤，取滞留液。

8.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤2中稳定剂加入量为0.004~0.007%，步骤5中稳定剂：菠萝蛋白酶粉末体积比为1:300~400。

9.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶的提取方法，其特征在于：所述的步骤5中冷冻干燥温度为-40~-50℃。