[发明专利]检测禽流感病毒与鸡细小病毒的成套试剂与方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，检测禽流感病毒与鸡细小病毒的成套试剂与方法。

背景技术

禽流感(Avian influenza，AI)是禽流行性感冒的简称，是一种由A型流感病毒引起的禽类(包括家禽和野禽)的感染，被世界动物卫生组织(OIE)和我国规定为A类动物疫病。根据禽流感致病性的不同，可分为高致病性禽流感(HPAI)和低致病性禽流感(LPAI)，其中以高致病性禽流感最为严重，该病毒不仅会在家禽中迅速传播，造成极高的死亡率，还会跨越物种传染屏障，从禽类传染到了人类。随着禽流感在我国以及全球频繁暴发，疫情范围不断扩大，禽流感暴发对经济和社会的影响已成共识，其影响程度将随着全球化发展日益加剧。鸡细小病毒(Chincken parvovirus，ChPV)是一种线性单链DNA病毒，ChPV是引发病毒性肠道疾病的病原体之一，其特征是发育不良、腹泻、饲料转化率低、高死亡率，尤其在幼禽肠炎中表现更高的死亡率。可见，这两种病毒引发的疾病对养禽业的发展造成严重的危害。

病原分离鉴定是针对病毒性疾病诊断常规的方法，但是该方法耗时长，针对多种病毒混合感染时又难以进行快速鉴别诊断。由于ChPV复制方式上具有独特性，在鸡胚和细胞中难以正常增殖，进一步加大该病毒的诊断难度。PCR技术直接以病原体的RNA或DNA为研究对象，检测组织中是否存在病原的核酸，可以快速准确的诊断出其有无病原体感染。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何同时检测禽流感病毒与鸡细小病毒。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了检测或辅助检测禽流感病毒与鸡细小病毒的成套试剂。

本发明所提供的检测或辅助检测禽流感病毒与鸡细小病毒的成套试剂，由名称为M-P的引物对和名称为ChPV-P的引物对组成；

所述M-P由序列表中SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的两条单链DNA(即M-F和M-R)组成；所述ChPV-P由序列表中SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的两条单链DNA组成(即ChPV-F和ChPV-R)。

上述成套试剂中，所述M-P与所述ChPV-P均可独立包装。所述M-P的两条单链DNA均可独立包装。所述M-P的两条单链DNA的摩尔比可为1:1。所述ChPV-P的两条单链DNA均可独立包装。所述ChPV-P的两条单链DNA的摩尔比可为1:1。

上述成套试剂中，所述M-P与所述ChPV-P可以单独使用分别进行单独的PCR，也可以组合使用进行二重PCR。

这两种引物对单独使用时，本申请的检测或辅助检测禽流感病毒与鸡细小病毒的成套试剂中这两种引物对的配比没有要求。这两种引物对组合使用时，所述M-P与所述ChPV-P的摩尔比为3：5。

为解决上述技术问题，本发明还提供了PCR引物对。

本发明所提供的PCR引物对为所述M-P和所述ChPV-P。所述M-P为检测或辅助检测禽流感病毒的引物对，所述ChPV-P为检测或辅助检测鸡细小病毒的引物对ChPV-P。

为解决上述技术问题，本发明还提供了检测或辅助检测禽流感病毒与鸡细小病毒的系统。

本发明所提供的检测或辅助检测禽流感病毒与鸡细小病毒的系统含有所述成套试剂。

为解决上述技术问题，本发明还提供了检测或辅助检测禽流感病毒的系统。

本发明所提供的检测或辅助检测禽流感病毒的系统含有所述M-P。

为解决上述技术问题，本发明还提供了检测或辅助检测鸡细小病毒的系统。

本发明所提供的检测或辅助检测鸡细小病毒的系统含有所述ChPV-P。

上述各系统均还可包括DNA聚合酶。所述DNA聚合酶具体可为北京全式金生物技术有限公司的2×Easy Taq PCR Super Mix中DNA聚合酶。

上述各系统还均可包括进行PCR扩增的仪器。

所述检测或辅助检测禽流感病毒与鸡细小病毒的系统可由所述成套试剂与所述DNA聚合酶组成。所述检测或辅助检测禽流感病毒的系统可由所述M-P与所述DNA聚合酶组成。所述检测或辅助检测鸡细小病毒的系统可由所述ChPV-P与所述DNA聚合酶组成。

上述各系统均可为试剂或试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明还提供了非诊断目的的检测禽流感病毒和鸡细小病毒的方法。