[发明专利]一种适于大豆磷效率筛选的SSR引物序列及其使用方法

说明书

本发明涉及农作物种质资源评价利用领域，具体涉及一种适于磷高效大豆基因型筛选的特异性SSR分子标记及应用。包括一种适于大豆磷效率筛选的SSR引物序列及大豆磷高效基因型的评价方法。本发明提供的方法，可以用于高效、准确地筛选磷高效大豆品种。

技术领域

本发明涉及农作物种质资源评价利用领域，具体涉及一种适于磷高效大豆基因型筛选的特异性SSR分子标记及应用。

背景技术

培育和推广磷高效的大豆品种具有重要的生态和经济意义。栽培大豆〔Glycine max(L.)Merrill 〕是重要的经济作物，是食用油和种子蛋白的主要来源之一，其生长在广泛的土壤环境中。磷是作物养分三要素之一。对于生长在土壤中的植物，磷是有限的矿质营养。它的可利用能力依赖于土壤特性和不稳定的磷含量。据估计，在世界2/3的栽培土壤中，有效磷总体上偏低，存在不同程度的缺磷现象。在缺磷时，蛋白质合成受阻，新的细胞质和细胞核形成较少，影响细胞分裂，生长缓慢，分枝或分蘖减少，植株矮小，开花期和成熟期都延迟，产量降低，抗性减弱。中国华南热带、亚热带地区，土壤有效磷含量低、利用率不高，严重影响大豆的产量和品质。传统的种植中通过在农业生产上大量使用磷肥，提高产量，此方法已造成磷资源的危机，环境污染问题也日益突出。为改变这一现状，现已转变策略，期望通过对大豆磷营养效率的遗传改良，使之能够更好地适应特定的生态条件。因此，开展大豆磷高效的种质资源筛选，培育磷高效的大豆新品种，提高大豆活化和利用土壤磷库的能力，使土壤磷库成为磷矿的替代资源，具有重大的生态和经济意义。

由于缺乏特异性评价指标，目前生产上常用的大豆磷高效种质资源筛选方法效率较低。植物对磷的吸收和利用能力的相对大小以磷效率（phosphorus efficiency）来表示。大豆不同品种（基因型）对磷缺乏有不同的适应机制。评价不同大豆品种磷缺乏条件下的适应性通常采用种质筛选法，即采用缺磷土壤（大田或土壤盆栽）或在水培条件下对大豆种质资源进行种植评价。这些方法都需要占用较大的空间，并且一般需要完成一个生长周期，耗费时间较长，受土壤、养分、水分、气候等因素会影响到试验结果的准确性。磷高效品种筛选，确定大豆磷效率的指数是非常重要的。大豆生长磷效率的评价指标有很多，如生长发育测定指标，包括根形态构型、生物量、叶面积、叶龄相对值、光合特性、生理生化指标、分蘖数（水稻）等。实践证明，并不是所有的参数指标对于磷高效大豆的评价和育种都是有效的。仅仅是一些容易测量到的和与磷效率相关的参数被用在大豆育种中。统计学上的评价方法包括单一参数、多样参数以及主要部分分析方法等。单一参数的评价直接显示了不同基因型在磷缺乏时比较根上部生物量、磷吸收和磷效率的比例。这些参数在磷可利用性土壤中是敏感的。与单一参数显示方法相比，多样参数评价如簇分析方法更优越，因为他综合分析了磷效率多样参数。然而，簇分析方法不能说明不同参数对磷效率的贡献，在磷效率评价中，其结果可能不准确。在此基础上，有人提出了一个折中方案，即主要部分分析方法，通过综合计算主要部分在低磷条件（-P）及低磷（-P）和高磷（+P）相对值参数的百分比的标准值得到的，保留超过1的特征值。种植介质无论是土壤还是水培，整个筛选过程工序多、耗费时间长、易受环境条件影响，且在水培条件下成熟难，易破坏原材料。尽管统计学方法上有所改善，但由于缺乏有效的特异性评价指标，造成成本高、效率低下，准确性欠佳。