[发明专利]一种利用糖来优选逆流色谱溶剂的方法

说明书

本发明提供一种利用糖来优选逆流色谱溶剂的方法，该方法是利用糖来增加天然产物分配系数和选择逆流色谱溶剂，具体是将一系列不同剂量的糖加入已选定的两相体系中并彻底混匀，分析糖剂量与分配系数的关系，然后根据这一关系确定需要的糖剂量，从而确定合适的逆流色谱溶剂的组成。采用该方法可以很容易的获得合适的溶剂，使得目标化合物在这一溶剂中具有合适的K值，尤其适用于成分复杂的天然产物，该方法简单实用，可大大减少逆流色谱溶剂选择的难度和时间，便于推广应用。

技术领域

本发明属于逆流色谱技术领域，涉及一种确定逆流色谱溶剂的方法，尤其涉及一种利用糖来优选逆流色谱溶剂的方法。

背景技术

逆流色谱是一种无需固相载体的全液－液相分配色谱，由于其不使用固相载体而仅使用液相作固定相，因此与其它色谱相比，逆流色谱有显著的优势，不仅可以避免固相载体造成的吸附、变性、拖尾等不利因素，使样品几乎100％回收，而且对于一些结构类似而分配系数不同的化合物，也常常有较好的选择性。此外，逆流色谱也容易较好地与其它色谱进行联用，解决分离中的问题。但是，由于天然产物成分复杂，逆流色谱分离天然产物仍有很多挑战，其关键还是在于两相分配。选择合适的溶剂体系是逆流色谱分离过程中的第一步也是最重要的一步，约占据了整个工作量的90％。尽管已经存在许多两相溶剂体系家族和相对应的溶剂选择策略，例如在Ito规律上建立的Ito溶剂体系、Arizona溶剂体系、以薄层色谱为基础的HEMWat溶剂体系猜测法、九九表式定向溶剂选择策略和别的以实验为基础的计算方法。但是选择合适的溶剂仍然需要专业的知识并且非常繁琐和耗时。因此，选择一个合适的溶剂，使目标化合物在这一溶剂中具有合适的K值，仍是当前研究的重点和难点。

发明内容

本发明的目的是针对上述现有逆流色谱分离过程中溶剂选择复杂、耗时长、需要专业知识等缺点，提供一种利用糖来优选逆流色谱溶剂的方法，经大量实验验证该方法是一种可行且简单的溶剂选择策略，可以快速地分离高纯度的黄酮类化合物和鬼臼毒素类化合物。

本发明提供一种利用糖来增加天然产物分配系数和选择逆流色谱溶剂的方法，该方法是将一系列不同质量分数的糖的水溶液加入已选定的两相溶剂中并彻底混匀得到两相体系，分析糖剂量与分配系数的关系，然后根据所需的分配系数确定合适的糖剂量，从而获得逆流色谱溶剂的组成。

上述技术方案中，所述的糖是蔗糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖、半乳糖、山梨糖、甘露糖、鼠李糖、木糖中的一种或多种组合。

上述的用来调节分配系数以获得糖剂量与分配系数关系的糖水溶液的质量分数可以是5-30％。

所述的两相体系是正己烷－乙酸乙酯－甲醇－糖的水溶液。

本发明的有益效果在于：

该方法简单实用，可大大减少逆流色谱溶剂选择的难度和时间，便于推广应用。

(1)糖是一种甜的、短链、可溶性的碳水化合物。作为添加剂，和盐析制备化合物的策略相比，糖析制备的策略更绿色更环保，不会产生盐腐蚀等并发症。

(2)本发明中添加糖到正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水的两相体系，可以改变溶剂以及化合物在两相体系中的分配，从而可以快速有效地找到合适的溶剂体系。

(3)采用正己烷、乙酸乙酯、甲醇、糖的水溶液两相体系进行逆流色谱分离，可以实现高纯度的逆流色谱制备。

(4)当吸附有含糖的纯品的反相C18色谱柱用甲醇和水洗脱时，也可良好地实现逆流色谱和柱色谱的连用，提高单位时间的生产效率，同时也降低能耗；也可以重复进行，便于自动化生产。

附图说明

图1在正己烷－乙酸乙酯－甲醇－水(4:6:4:6，v/v)体系中，蔗糖与化合物K值关系图；

图2.在正已烷－乙酸乙酯－甲醇－水(5:5:5:5，v/v)体系中，蔗糖与化合物K值关系图；