[发明专利]用于鉴定六种褐腐病菌的实时荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法有效
申请号: | 201710038408.1 | 申请日: | 2017-01-19 |
公开(公告)号: | CN106755476B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 朱小琼;国立耘;王静茹 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;白艳 |
地址: | 100083 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 六种褐腐 病菌 实时 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于鉴定或辅助鉴定褐腐病菌的成套引物,其包括Mfc引物探针组合物、Mla引物探针组合物、Mmu引物探针组合物、Mfg引物探针组合物、Myu引物探针组合物和Mpo引物探针组合物;
所述Mfc引物探针组合物由Mfc引物对和Mfc探针组成;所述Mfc引物对由上游引物MfcF和下游引物MfcR组成;所述上游引物MfcF的核苷酸序列为序列表的序列1,所述下游引物MfcR的核苷酸序列为序列表的序列2;所述Mfc探针的核苷酸序列为序列表的序列3;
所述Mla引物探针组合物由Mla引物对和Mla探针组成;所述Mla引物对由上游引物MlaF和下游引物MlaR组成;所述上游引物MlaF的核苷酸序列为序列表的序列4,所述下游引物MlaR的核苷酸序列为序列表的序列5;所述Mla探针的核苷酸序列为序列表的序列6;
所述Mmu引物探针组合物由Mmu引物对和Mmu探针组成;所述Mmu引物对由上游引物MmuF和下游引物MmuR组成;所述上游引物MmuF的核苷酸序列为序列表的序列7,所述下游引物MmuR的核苷酸序列为序列表的序列8;所述Mmu探针的核苷酸序列为序列表的序列9;
所述Mfg引物探针组合物由Mfg引物对和Mfg探针组成;所述Mfg引物对由上游引物MfgF和下游引物MfgR组成;所述上游引物MfgF的核苷酸序列为序列表的序列10,所述下游引物MfgR的核苷酸序列为序列表的序列11;所述Mfg探针的核苷酸序列为序列表的序列12;
所述Myu引物探针组合物由Myu引物对和Myu探针组成;所述Myu引物对由上游引物MyuF和下游引物MyuR组成;所述上游引物MyuF的核苷酸序列为序列表的序列13,所述下游引物MyuR的核苷酸序列为序列表的序列14;所述Myu探针的核苷酸序列为序列表的序列15;
所述Mpo引物探针组合物由Mpo引物对和Mpo探针组成;所述Mpo引物对由上游引物MpoF和下游引物MpoR组成;所述上游引物MpoF的核苷酸序列为序列表的序列16,所述下游引物MpoR的核苷酸序列为序列表的序列17;所述Mpo探针的核苷酸序列为序列表的序列18。
2.根据权利要求1所述的成套引物,其特征在于:
每个所述引物探针组合物中的上游引物和下游引物的摩尔比均为1:1。
3.根据权利要求1或2所述的成套引物,其特征在于:
在所述探针的5’末端均修饰荧光基团FAM;
在所述Mfc探针的3’末端修饰淬灭基团BHQ;
在所述Mla探针、所述Mfg探针、所述Myu探针、所述Mmu探针和所述Mpo探针的3’末端均修饰淬灭基团MGB。
4.一种用于鉴定或辅助鉴定褐腐病菌的实时荧光PCR试剂,其包括权利要求1-3中任一所述的成套引物。
5.一种用于鉴定或辅助鉴定褐腐病菌的试剂盒,其包括权利要求1-3中任一所述的成套引物或权利要求4所述的实时荧光PCR试剂。
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