[发明专利]一种组氨酸荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种组氨酸荧光探针，其特征在于，包括对组氨酸敏感的多肽B和荧光蛋白A；所述的荧光蛋白A插入到多肽B中，将多肽B分为多肽B1和多肽B2两个部分，形成B1-A-B2式结构的探针；

所述多肽B为HBP；

所述HBP的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述荧光蛋白A插入多肽B的插入位点为89/90，89/91，89/92，89/93，90/91，90/92，90/93，91/92，91/93，92/93。

2.根据权利要求1所述的组氨酸荧光探针，其特征在于，所述的荧光蛋白A为黄色荧光蛋白cpYFP，所述黄色荧光蛋白cpYFP的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.根据权利要求2所述的组氨酸荧光探针，其特征在于，所述黄色荧光蛋白cpYFP替换为氨基酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.10所示绿色荧光蛋白cpGFP、氨基酸序列如SEQID NO.5或SEQ ID NO.11所示蓝色荧光蛋白cpBFP、氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示青色荧光蛋白cpTFP、氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示橘黄色荧光蛋白cpmOrange、氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示苹果红荧光蛋白cpmApple、氨基酸序列如SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.13所示红色荧光蛋白cpmKate和氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示红色荧光蛋白mcherry中的一种。

4.编码权利要求1所述B1-A-B2式探针的核苷酸序列。

5.权利要求1～3任意一项所述的组氨酸荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

1)将权利要求4所述的核苷酸序列与pRSETb载体连接，得到大肠杆菌重组表达载体；

2)将所述大肠杆菌重组表达载体转移到宿主细胞中；

3)培养所述宿主细胞，分离得到组氨酸荧光探针。

6.一种包括权利要求1～3任意一项所述的组氨酸荧光探针的组氨酸检测试剂盒。

7.权利要求1～3任意一项所述的组氨酸荧光探针或权利要求5所述的制备方法制备得到的组氨酸荧光探针在组氨酸实时定位、定量检测以及高通量化合物筛选非疾病诊断或治疗目的的应用。