[发明专利]人NCAPH基因的用途

说明书

本发明公开了人NCAPH基因在制备治疗结肠癌药物中的用途，即人NCAPH基因作为针对癌症细胞的作用靶点应用于制备治疗结肠癌药物，所述针对癌症细胞的作用靶点为RNA干扰作用靶标；与正常结肠细胞相比，NCAPH基因在结肠癌细胞中高表达，针对NCAPH基因设计的RNA干扰慢病毒，抑制NCAPH表达，能显著抑制结肠癌细胞的增殖、使肿瘤细胞分裂阻滞在G2/M期，促进细胞的凋亡、抑制细胞的迁移、抑制裸鼠移植肿瘤的形成，进而能达到治疗结肠癌的目的，表明人NCAPH基因可以作为结肠癌治疗的靶点，为将来基于NCAPH基因的结肠癌治疗药物的开发提供广阔的前景。

技术领域

本发明涉及一种基因的新用途，尤其是人NCAPH基因的新用途。

背景技术

结肠癌是世界上主要的恶性肿瘤之一，其中每年大约 120 万新发病例和600,000人死亡，结肠癌患者的预后在过去几十年期间有所改善，其侵袭和转移是在临床治疗时最大的问题之一，是治疗失败的最常见原因，涉及肿瘤细胞侵袭、细胞外基质降解、上皮-间充质细胞转换和血管生成等。淋巴结转移是主要转移方式，决定结肠肿瘤分期，辅助治疗计划及预后评价等；多个基因及/或多条信号通路累积突变调节可诱发结肠癌。

染色体不稳定性与肿瘤之间存在某种联系，人类肿瘤细胞中存在两种类型的基因组不稳定性，一种是错配修复导致的核苷酸水平的遗传不稳定性，即基因突变。另一种是在染色体水平产生的遗传不稳定性，称为染色体不稳定性，染色体不稳定性是人类实体瘤中常见的现象之一，在肿瘤的发生发展中有重要的作用。集缩蛋白（Condensins）是多蛋白复合物，与染色体结构细胞周期性的动态变化紧密相关，它们参与有丝分裂染色体的集缩和分离。性染色体的剂量补偿效应、遗传重组和DNA修复等过程，在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。

NCAPH基因是非SMC集缩蛋白复合物I的H亚基(non-SMC condensin 1 complexsubunit H)，是巴尔蛋白家族的成员之一，是集缩蛋白复合物的调节亚基，在间期染色体转变成浓缩的染色体的过程中起重要作用。到目前为止，还没有NCAPH在结肠癌中的报道。

RNA干扰现象是细胞内自主产生的生物进化过程中一项保守的防御机制，已成为一种通过抑制目的基因的表达来研究哺乳动物基因产物功能的强大的工具。

发明内容

本发明的目的在于提供人NCAPH基因的新用途，即人NCAPH基因作为针对结肠癌细胞的作用靶点应用于制备治疗结肠癌药物，所述针对结肠癌细胞的作用靶点为RNA干扰作用靶标。

所述RNA干扰作用靶点选自下述核苷酸序列：

SEQ ID NO:1︰TCAGAGATTCTTAAACAGAAA；

SEQ ID NO:2︰TCTCCTAAATTGATCTGTTAT。

将抑制人NCAPH基因表达的shRNA序列克隆入慢病毒载体后获得RNA 干扰慢病毒，用于制备结肠癌基因治疗药物；表达shRNA 的序列包括两个靶向人NCAPH基因编码DNA的反向重复序列，中间由一茎环序列分隔；其中，两个反向重复序列分别为人NCAPH基因的shRNA靶点序列及其互补序列；所述人NCAPH基因的shRNA 靶点核苷酸序列选自下述核苷酸序列：

SEQ ID NO:1︰TCAGAGATTCTTAAACAGAAA；

SEQ ID NO:2︰TCTCCTAAATTGATCTGTTAT。

所述表达shRNA 的序列的正义链序列如 SEQ ID NO:3 所示，反义链序列如 SEQID NO:4 所示；或者正义链序列如 SEQ ID NO:5所示和反义链序列如SEQ ID NO:6所示。

Forward oligo: NCAPH FO1（SEQ ID NO:3）