[发明专利]壳聚糖作为胰脂肪酶抑制剂的用途

说明书

本发明公开了一种壳聚糖作为胰脂肪酶抑制剂的用途，所述壳聚糖的结构式如式Ⅰ所示，式中n＝1800‑11200。壳聚糖的平均分子量为300kDa‑1800kDa，本发明拓宽了壳聚糖的应用范围，为筛选具胰脂肪酶活性抑制功能的天然活性物质开辟新途径。

技术领域

本发明涉及海洋生物技术领域，具体涉及一种壳聚糖作为胰脂肪酶抑制剂的用途。

背景技术

肥胖是由机体能量代谢失衡导致的一种慢性营养性疾病，全球肥胖人群人数逐年攀升。研究表明肥胖是引起非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、Ⅱ型糖尿病、动脉粥样硬化(AS)、肿瘤、睡眠障碍、骨关节炎等多种疾病的重要因素。胰脂肪酶是水解膳食脂肪最重要的酶，能够将人体摄入的脂肪逐步水解转化为甘油和游离的脂肪酸，对人体脂肪堆积、肥胖形成具有重要意义，因此通过抑制胰脂肪酶的活性可以控制高脂饮食引起的肥胖。壳聚糖是一种天然的碱性多糖，由氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖通过β-1,4糖苷键连接而成。由于壳聚糖来源丰富，生理活性广泛，安全无毒，且具有良好的生物兼容性，在食品医药、农业、材料科学等领域具有很大的应用潜力。我们在实验中发现，平均分子量300kDa-1800kDa，最优选1200kDa±3kDa的壳聚糖可以有效抑制胰脂肪酶活性，这一发现，不仅拓宽了壳聚糖的应用范围，也为筛选具胰脂肪酶活性抑制功能的天然活性物质开辟新途径。

发明内容

本发明的目的是提供一种壳聚糖作为胰脂肪酶抑制剂的用途。

本发明实现目的的方案如下：

壳聚糖作为胰脂肪酶抑制剂的用途，所述壳聚糖的结构式如式Ⅰ所示，式中n＝1800-11200。

优选的；所述壳聚糖的平均分子量为1200kDa±3kDa。

壳聚糖抑制胰脂肪酶活性的实验方法为：将壳聚糖用50mM Tris-HCl(pH 8.0)缓冲液溶解并稀释，得到壳聚糖溶液。然后向胰脂肪酶溶液中加入壳聚糖溶液，使壳聚糖与胰脂肪酶的质量比大于或等于2:1，37℃预处理15min后，向以上混合物中加入底物4-硝基苯基丁酸酯(PNPB)启动反应，37℃恒温振荡15min。反应结束后，立即沸水浴终止实验，冷却后用酶标仪测量A_405nm。根据对硝基苯酚浓度吸光度(A_405nm)标准曲线，得到反应结束后体系中对硝基苯酚浓度，根据以下公式计算胰脂肪酶活性及壳聚糖对胰脂肪酶的抑制率：

式中：酶活力，U；对硝基苯酚浓度，μmol/L；反应终体积，mL；反应时间，min；酶液用量，mL。

本发明的优点：

1)本发明利用平均分子量300kDa-1800kDa，最优选1200kDa±3kDa的壳聚糖抑制胰脂肪酶活性，指出壳聚糖可作为胰脂肪酶抑制剂使用，扩展了壳聚糖的应用范围。

2)本发明明确了壳聚糖平均分子量与胰脂肪酶活性之间的关系，为筛选具胰脂肪酶活性抑制功能的天然活性物质开辟新途径。

附图说明

图1为本发明中使用的平均分子量为1800kDa的壳聚糖样品的高效液相色谱图谱；

图2为本发明中使用的平均分子量为1500kDa的壳聚糖样品的高效液相色谱图谱；

图3为本发明中使用的平均分子量为1200kDa的壳聚糖样品的高效液相色谱图谱；

图4为本发明中使用的平均分子量为900kDa的壳聚糖样品的高效液相色谱图谱；

图5为本发明中使用的平均分子量为600kDa的壳聚糖样品的高效液相色谱图谱；