[发明专利]杂交瘤细胞株7G11及其抗体

说明书

本发明涉及一种杂交瘤细胞株7G11及其抗体，杂交瘤细胞株7G11于2016年12月27日送中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO:C201703，该杂交瘤细胞株7G11能够产生抗细交链格孢菌酮酸的单克隆抗体，能够特异性检测细交链格孢菌酮酸，对细交链格孢菌酮酸检测具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及杂交瘤细胞株7G11，还涉及由该杂交瘤细胞株7G11产生的抗体。

背景技术

细交链格孢菌酮酸(Tenuazonic acid，TA)是链格孢霉、稻瘟病霉、高粱点霉等在特定条件下产生的有毒代谢产物之一，是继交链孢酚(Alternariol，AOH)、交链孢酚单甲醚(Alternariol monomethyl ether，AME)后发现的一种链格孢霉毒素。TA具有急性毒性、亚急性毒性、潜在致癌性、细胞毒性，导致哺乳类动物头晕、流涎、呕吐继而出现心跳过速、食道和肠胃大面积出血及循环衰竭、死亡。由于TA具有多种生物学特性，且是链格孢霉毒素中毒性最大的一种，有研究报道TA可以协同增强其他真菌毒素，具有巨大的潜在危害，近些年越来越引起各方关注和研究。

TA人工抗原合成方法及多克隆抗体制备已有部分报道，如江涛等利用碳二亚胺法对TA结构进行修饰，与牛血清蛋白偶联制备人工抗原；马良等采用肟化法对TA进行衍生引入偶联臂，与牛血清蛋白和血蓝蛋白偶联，偶联物免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体；杨星星等利用水合肼和乙醛酸依次对TA进行衍生，合成含氮杂共轭双键偶联臂，与牛血清蛋白进行偶联得到完全抗原，通过免疫新西兰大白兔制备特异性识别TA衍生物的多克隆抗体，并建立ELISA检测方法。

多克隆抗体制备时间短、制备成本低，但在特异性方面比单克隆抗体差，不同批次和不同动物的免疫反应之间的有差别。单克隆抗体特异性高，一旦筛选到目标细胞株，理论上就可以生产完全一致的抗体，并且通过连续培养法可以获得大量的性能一致的抗体，产品的批间差异小。目前关于TA单克隆抗体的制备及其产品开发目前处于空白阶段，尚无任何报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种杂交瘤细胞株7G11；本发明的目的之二在于提供杂交瘤细胞株7G11的制备方法；本发明的目的之三在于提供由杂交瘤细胞株7G11产生的单克隆抗体；本发明的目的之四在于提供上述单克隆抗体的制备方法；本发明的目的之五在于提供单克隆抗体的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、杂交瘤细胞株7G11，所述杂交瘤细胞株7G11的生物保藏编号为CCTCC NO：C201703。

2、所述杂交瘤细胞株7G11的制备方法，将TAO偶联血蓝蛋白免疫原与弗氏佐剂混合免疫小鼠，然后取效价大于1：10000的免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，融合后培养10天后进行ELISA检测，经筛选亚克隆获得杂交瘤细胞。

优选的，融合中所述脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0数量比为1：20。

3、由杂交瘤细胞株7G11产生的单克隆抗体，所述杂交瘤细胞株7G11的生物保藏编号为CCTCC NO：C201703。

4、所述单克隆抗体的制备方法，将杂交瘤细胞株7G11制备腹水，然后进行ProteinA纯化，得单克隆抗体。

5、所述单克隆抗体在制备检测TAO抗原的试剂中的应用。

优选的，所述单克隆抗体在制备elisa竞争法检测细交链格孢菌酮酸的试剂中的应用。

优选的，所述单克隆抗体在制备elisa间接法检测细交链格孢菌酮酸的试剂中的应用。