[发明专利]一种纳米金铜猝灭硫化锌镉电致发光胰岛素传感器的制备方法

说明书

本发明涉及一种纳米金铜猝灭硫化锌镉电致发光胰岛素传感器的制备方法，属于电致发光传感器领域。硫化锌镉的电致发光光谱与纳米金铜的紫外吸收图谱有很好的重叠，纳米金铜可作为受体，与硫化锌镉发生能量共振转移，从而猝灭硫化锌镉的电致发光响应。以金包裹硫化锌镉/氨基化氮掺杂介孔碳Au@Zn_xCd_1‑xS/NMC作为胰岛素捕获抗体基底材料。以纳米金铜AuCu作为胰岛素检测抗体固载材料。锌的掺杂可提高CdS的电致发光响应，以Zn_xCd_1‑xS为电致发光信号源，利用AuCu对Zn_xCd_1‑xS电致发光的猝灭效应，根据对不同浓度的胰岛素的电化学发光信号强度的不同，实现对胰岛素的检测。

技术领域

本发明涉及一种纳米金铜猝灭硫化锌镉电致发光胰岛素传感器的制备方法。具体涉及一种硫化锌镉作为发光材料，利用氨基化氮掺杂介孔碳优良的导电性和大的比表面积作为基底材料增加发光体和抗体的固载量，纳米金铜作为二抗标记物，制备一种检测胰岛素的夹心型电化学发光免疫传感器，属于电化学发光检测技术领域。

背景技术

胰岛素是胰岛细胞分泌的一种蛋白质激素，既能促进血液中的葡萄糖进入肝、肌肉和脂肪等组织细胞，又能促进葡萄糖氧化分解释放能量，供机体利用，是维持血糖在正常水平的主要激素。胰岛素分泌不足或缺乏时，会引起高血糖，甚至是糖尿病。因此，能否准确测定血液中胰岛素的浓度，对高血糖或糖尿病的早期诊断、临床和基础研究具有重要的价值。

目前检测胰岛素的分析方法主要有免疫分析法、色谱法，但是这两种方法操作繁琐，灵敏度低，因此，为了克服以上传统分析方法的缺点，本发明设计了一种特异性强，灵敏度高，操作快速简便的电致发光免疫分析方法。

本发明制备了金包裹硫化锌镉纳米材料，进一步放大了硫化锌镉的电化学发光信号，利用氨基化氮掺杂介孔碳作为载体，其具有良好的导电性和较大的比表面积，通过金氨键连接大量的金包裹硫化锌镉，在放大电化学发光信号的同时，也增加捕获抗体的固载量，同时合成了纳米金铜，利用纳米金铜与硫化锌镉之间的能量共振转移，在一定程度上猝灭硫化锌镉的电化学发光。该方法可有效用于胰岛素的分析。该方法具有成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速等优点，而且制备过程较为简单，有效克服了目前胰岛素检测方法的不足。

发明内容

本发明的目的之一是合成氨基化氮掺杂介孔碳纳米材料，介孔碳材料拥有较大的比表面积和多孔结构，有利于电解液中共反应剂的扩散，使共反应剂快速达到电极表面；相比于介孔碳，氮掺杂介孔碳具有更高的稳定性、导电性，用其构建传感器可增强电子转移速率，提高传感器的稳定性。其较大的比表面积有利于固载更多的发光体和捕获抗体，增强传感器的灵敏度。氮掺杂介孔碳表面含有大量的氨基，可用于进一步与金纳米粒子结合，将金包裹硫化镉固定在电极表面。

本发明的目的之二是制备金包裹硫化锌镉，探究了不同掺杂量的锌对硫化镉电化学发光响应的影响，相比于硫化镉，通过锌的掺杂进一步增强硫化锌镉的电化学发光性能。金纳米粒子固载在硫化锌镉表面，金纳米粒子优异的导电性能可加速电子转移速率，进一步增强硫化锌镉的电致发光；同时，金纳米粒子起到桥梁的作用，可同过金氨健结合，将金包裹硫化镉固载在电极表面，还将胰岛素捕获抗体捕获至电极表面。

本发明的目的之三是合成纳米金铜，纳米金铜的紫外吸收图谱与硫化锌镉的电致发光光谱有很好的重叠，纳米金铜作为受体，硫化锌镉作为供体，二者之间可以发生能量共振转移，从而猝灭硫化锌镉的电致发光响应；同时利用纳米金铜良好的生物相容性，用于捕获胰岛素检测抗体，进而用于构建胰岛素夹心型电致发光免疫传感器。

本发明的目的之四利用纳米金铜对硫化锌镉电致发光的猝灭效应，构建一种高效、灵敏的夹心型电致发光免疫传感器，将该夹心型电致发光免疫传感器应用于胰岛素的快速、灵敏检测，通过猝灭型传感策略实现对胰岛素的痕量检测。

本发明的技术方案如下：