[发明专利]用于检测心脏病的piRNA组合及其应用

说明书

本发明提供一种用于检测心脏病的piRNA组合及其应用，所述piRNA组合包含如1‑16所示的16种RNA序列的一种或多种；及piRNA组合在制备用于预测、诊断、鉴别和/或治疗心脏病的药物或试剂盒中的应用。本发明为找到在心肌缺血损伤和心肌梗死中起到关键调节作用的piRNA，研究他们的调控机理提供了一套完整的方法。本发明的研究方法有助于阐明心肌梗死发病机制及为心肌梗死的预防和诊断提供了新的思路，特别是开发piRNA作为治疗心脏疾病的药物具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及用于检测心脏病的RNA，尤其涉及一种用于检测心脏病的piRNA组合及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

心肌梗塞，是一种严重的缺血性心脏疾病，是人类健康的重大威胁。在我国居民主要疾病死亡构成比中，心血管疾病占居首位，估计我国现有心血管病患人数至少2.3亿。随着人口老龄化的增长，我国心血管疾病的发生数将大幅上升，估计在2030年，我国的心血管病患者将增加2130万，心血管病患死亡人数将增加770万。

缺血性心肌损伤是由于冠脉循环改变引起冠脉血流和心脏需求之间不平衡而导致心肌损害，而部分心肌的血液循环突然全部中断而引发心肌细胞损伤，造成心肌梗塞。

目前心梗发生后唯一治疗的方式是采取溶栓治疗，恢复血液供应，这种现象即为缺血-再灌注(ischemia reperfusion，IR)。缺血一定时间的心肌再重新恢复血液供应后，心肌不一定都会恢复其正常功能和结构，反而出现心肌细胞损伤加重的表现，即缺血-再灌注损伤(ischemia reperfusion injury，IRI)，这一损伤是心脏外科、冠脉搭桥术等手术期间心肌损伤的主要因素，其损伤表现为心肌细胞的坏死、凋亡、线粒体功能障碍自由基大量生成，并导致恶性心率失常发生，左心室收缩力减弱、导致心力衰竭。

piRNA(piwi-interacting RNA)是近年来新发现的一类非编码小RNA分子，总数超过4万种，长度约26～3lnt，序列5’端具有尿嘧啶偏向性(约86％)，piRNA成簇形成基因座(loci)分布于基因组上，特异性地同Argonuat蛋白家族中的Piwi亚家族蛋白结合，并因此而得名。2006年首次在小鼠精子细胞分离得到，最初发现piRNA主要在生殖 细胞系中表达，对维持生殖DNA完整、抑制转座子转录、抑制翻译、参与异染色质的形成、执行表观遗传调控和生殖细胞发生等均有重要作用。随着研究的深入，人们发现piRNA可以在很多体细胞组织中广泛或者特异性表达，包括心脏、脑、肝脏、脾脏、肾脏、肺、胃、小肠、结肠、卵巢、子宫、睾丸。

至今在果蝇、小鼠、斑马鱼、线虫、涡虫、人体内都发现了piRNA，但在果蝇和小鼠中研究的比较多。已有研究表明果蝇中piRNA通路相关基因的突变会破坏干细胞维持、卵巢形成和胚胎轴发育，piRNA结合蛋白piwi的突变也会导致严重的卵巢缺陷，包括生殖干细胞的丢失。另外，无性研究显示干细胞的维持和分裂需要体细胞表达piwi蛋白来形成干细胞壁龛，如果缺少了piwi蛋白，将会降低干细胞分裂的速率。例如，zucchini基因和squash基因的突变会使生殖干细胞缺失。piRNA还对维持生殖细胞DNA完整性有重要作用，果蝇中aubergine,spindle E,armitage,maelstrom,krimper,zucchini和squash基因的异常会破坏一些部位RNA的定位。通过对减数分裂DNA修复基因的研究，一定程度上阐明了piRNA和DNA损伤之间的信号传送机制。