[发明专利]一种兰科植物的育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物育种技术，具体属于一种兰科植物的育种方法。

背景技术

兰科植物是单子叶第一大植物，其中许多极具价值的高档花卉和珍贵药用植物。君子兰、蕙兰等中国兰自古以来就是文人心中高风亮节的代表花朵。兰花以其强韧的生命力和环境适应力，优美雅丽的花朵，被赋予高雅脱俗的人文意义。蝴蝶兰(Phalaenopsis)又称蝶兰,是兰科植物中栽培最广泛、最普及的种类之一。由于，花色艳丽丰富，花形别致，花大，开花期长(2-3个月)，深受人们的喜爱,享有“花中皇后”的美誉。素有“九大仙草之首”之称的铁皮石斛更是名贵的中药材。具有滋阴养胃，抗癌抑菌，降糖降压等重要功效。

虽然兰科植物具有重要的经济价值，但是由于兰科植物的种子无胚乳，自然条件下，萌发率极低或者不能萌发，加之兰科植物生长发育慢，新品种选育需要经过漫长的时间，因此，兰科植物普遍存在着品种结构单调，优种繁育周期长等弊病。因此，高效的育种、繁殖技术对兰科植物产业的高速发展具有重要意义，同时也是育种行业迫切需要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种兰科植物的育种方法。

本发明提供的一种兰科植物的育种方法，包括如下步骤：

1)根据育种目标选取兰科植物亲本材料进行栽植培养，在盛花期进行人工授粉，授粉后100-150天采收果荚；

果荚经消毒后，在无菌条件下播种于种子萌发培养基上，置于25±2℃下培养，光照时间16小时/天，光照强度2000±100lx；50天后，诱导出原球茎；

所述的萌发培养基为：花宝1号2-4g/L+6-BA1-5mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L+活性炭1-2g/L；

2)将诱导出的原球茎转入类原球茎诱导培养基上诱导产生类原球茎及增殖培养；培养条件：25±2℃，光照时间16小时/天，光照强度2000±100lx；

所述的类原球茎诱导培养基为：花宝1号2-4g/+6-BA 1.0-6.0mg/L+NAA0.1-0.8mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L+活性炭1-2g/L；

3)类原球茎基因型鉴定：利用过氧化物酶(POD)同工酶对类原球茎的进行鉴定；根据POD同工酶条带的位置和颜色深浅确定其与亲本的关系，对获得的类原球茎个体进行筛选；

4)将入选的类原球茎，无菌条件下，接种于花宝1号2-4g/L+6-BA 1.0-4.0mg/L+NAA0.2-0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L+活性炭1-2g/L，pH为5.4-5.8的分化培养基中培养；培养条件：温度为25.0±2℃，光照时间16小时/天，光照强度2000±100lx；培养30天后分化出芽和根；

5)将分化出的兰科植物幼苗培养于壮苗培养基中生长至幼苗长出3-5片叶，移入温室生长至开花；

所述的壮苗培养基为：花宝1号2-4g/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1-2.0g/L，pH为5.4-5.8；培养条件：温度为25.0±2℃，光照时间16小时/天，光照强度为2000±100lx，空气湿度为65％-80％。

与目前常规的兰科植物杂交育种技术相比，本发明具有如下优点和有益效果：

1)本发明利用现代生化技术或分子生物学技术，对杂交一代进行快速鉴定，不需要先选育自交系，节省了育种的时间。

2)本发明利用原球茎诱导产生类原球茎并诱导类原球茎进行增殖，大大扩大了种子的数量，又节省了种子繁育时间。

3)本发明不仅为兰科植物提供了一个新的育种技术，而且也为其他难以进行正常有性繁殖的植物种提供了可以借鉴得育种技术。

附图说明

图1蝴蝶兰品种HCH(左)和品种HOO7(右)，为本实验蝴蝶兰杂交的母本和父本。

图2蝴蝶兰原球茎发育图，其中：A播种45天的蝴蝶兰原球茎；B蝴蝶兰原球茎接种于增殖培养基30d后的生长情况；C类蝴蝶兰原球茎接种于分化培养基60天后的生长情况

图3蝴蝶兰类原球茎POD同工酶分析，其中：1.母本；5.父本；2-4.为不同的杂交后代。

图4铁皮石斛原球茎发育图，其中：A播种50天的铁皮石斛原球茎；B铁皮石斛原球茎增殖；C铁皮石斛再生苗

图5铁皮石斛类原球茎POD同工酶分析，其中：1.为自交亲本；2-为自交后代。

具体实施方式

实施例1蝴蝶兰杂交育种

(1)蝴蝶兰杂交及杂交种子无菌播种方法