[发明专利]一种表达蛋白质或多肽的方法及其专用表达盒

说明书

本发明公开了一种表达蛋白质或多肽的方法及其专用表达盒。本发明提供的方法包括如下步骤：(1)将重组载体Ⅰ导入受体植物，得到转基因植物；(2)通过培养所述转基因植物得到蛋白质或多肽；所述重组载体Ⅰ含有表达盒Ⅰ；所述表达盒Ⅰ自上游至下游依次包括如下元件：植物种子特异表达蛋白基因的启动子、融合基因Ⅰ和终止序列；所述融合基因Ⅰ中含有区段乙；所述区段乙编码目的物或目的物的前体；所述目的物为蛋白质或多肽。实验证明，采用本发明提供的方法可以得到鲑鱼降钙素。因此，利用本发明所提供的方法表达蛋白质或多肽，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种表达蛋白质或多肽的方法及其专用表达盒。

背景技术

植物的种子中含有大量的蛋白质、碳水化合物和脂肪，且有便于储存和运输。油菜种子中蛋白质含量高，是进行外源重组蛋白表达的理想植物材料。利用转基因油菜来生产重组蛋白质具有生产成本低,纯化过程简单、技术含量低,规模化容易,蛋白质含量高、产品质量高,安全无污染的优点,并且可以在温室条件下,各方面均优于细菌、酵母、动物细胞、转基因动物等生产体系。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何表达蛋白质或多肽。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了表达盒Ⅰ。

本发明所提供的表达盒Ⅰ自上游至下游依次可包括如下元件：植物种子特异表达蛋白基因的启动子、融合基因Ⅰ和终止序列；

所述融合基因Ⅰ中可含有区段乙；所述区段乙编码目的物或目的物的前体；所述目的物可为蛋白质或多肽。

所述融合基因Ⅰ中，5’末端为起始密码子，3’末端为终止密码子，中间为连续的编码区。

所述目的物的前体在生物体中可自发形成目的物。

所述融合基因Ⅰ还可包括区段甲；所述区段甲编码筛选标记蛋白。

所述融合基因Ⅰ还可包括一个以上区段丙；所述区段丙编码蛋白标签。

当融合基因Ⅰ中包括2个以上区段丙时，每个区段丙可以编码不同的蛋白标签。

所述融合基因Ⅰ还可包括区段丁；所述区段丁可为切割物质的识别序列。

所述融合基因Ⅰ自上游至下游依次可包括如下区段：所述区段丙、所述区段甲、所述区段丁和所述区段乙。所述区段丙具体可编码6×His标签。

所述目的物可为鲑鱼降钙素。所述目的物的前体可为鲑鱼降钙素的前体。

所述区段乙可为如下b1)或b2)或b3)或b4)所示的DNA分子：

b1)具有序列表中序列4自5′末端起第34至132位核苷酸所示的DNA分子；

b2)核苷酸序列是序列表中序列4自5′末端起第34至132位所示的DNA分子；

b3)与b1)或b2)限定的核苷酸序列具有85％或85％以上同一性，且编码所述鲑鱼降钙素的前体的DNA分子；

b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述鲑鱼降钙素的前体的DNA分子。

所述表达盒Ⅰ的核苷酸序列具体可如序列表中序列5所示。

为解决上述技术问题，本发明还提供了表达盒Ⅱ。

本发明所提供的表达盒Ⅱ自上游至下游依次可包括如下元件：植物种子特异表达蛋白基因的启动子、融合基因Ⅱ和终止序列；所述融合基因Ⅱ中可含有区段戊；所述区段戊为供编码目的物或目的物的前体的基因插入的插入位点；所述目的物为蛋白质或多肽。

所述融合基因Ⅱ中，5’末端为起始密码子，3’末端为终止密码子，中间为连续的编码区。