[发明专利]一种淋巴细胞染色体G带的制备方法在审
| 申请号： | 201710009950.4 | 申请日： | 2017-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN107063788A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 欧明林;龚蔚蔚;荆环云 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第一八一医院 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N1/30 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司11212 | 代理人： | 周锦全 |
| 地址： | 541002 广*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 淋巴细胞 染色体 制备 方法 | ||
1.一种淋巴细胞染色体G带的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：接种
1.1.取外周血，接种于3mL含小牛血清的淋巴细胞培养液中，于37℃恒温培养68-74h；
1.2.于终止培养前1.5h，加入秋水仙素，得到血液和培养液的混合液；
步骤2：收获细胞
2.1.将步骤1.2得到的血液和培养液的混合液，倒入离心管内，1500r/min离心10-15min，取出，弃去上清；
2.2.低渗：加入已预温至37℃的8mL的0.075mol/L KCl中，混匀，再于37℃恒温孵育12min；
步骤3：细胞固定
3.1.加入固定液2mL，混匀，静置2min，1500r/min离心10-15min；
3.2.取出，弃去上清，加入固定液8mL，混匀，静置30min，1500r/min离心10-15min；
3.3.取出，弃去上清，加入固定液8mL，混匀，静置2-3h，1500r/min离心10-15min；
3.4.取出，弃去上清，加入固定液，混匀，制成细胞悬液；
步骤4：制片
4.1.滴片：将步骤3.4制成的细胞悬液充分混匀，将细胞悬液滴于玻片左侧1/3处，随后将玻片向右下倾斜，待细胞悬液自然扩散直至布满整张玻片；
4.2.将玻片水平放置，于60-70℃干燥烘烤过夜或75-80℃烘烤3h，经胰酶消化和吉姆萨染色，即得所述淋巴细胞染色体G带。
2.根据权利要求1所述的一种淋巴细胞染色体G带的制备方法，其特征在于，步骤1.1中，所述外周血为0.3-0.8mL。
3.根据权利要求1所述的一种淋巴细胞染色体G带的制备方法，其特征在于，步骤4.1中，所述滴片的环境温度为25℃，湿度为50-70％；所述细胞悬液滴于玻片前，与玻片的距离小于2cm；所述玻片为冰水混合物浸泡过的冰玻片。
4.根据权利要求1所述的一种淋巴细胞染色体G带的制备方法，其特征在于，步骤4.2中，所述玻片水平放置的工具为烤片架，所述干燥过夜的温度为65℃。
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