[发明专利]一种人血清中非Gal异种抗体检测方法

权利要求书

1.一种非诊断治疗目的的人血清中非Gal异种抗体检测方法，用于猪器官移植到人体的异种器官移植中受体人中抗供体猪非Gal抗原的抗体的检测，其特征在于，所述方法包括：按照10⁵个细胞与100μL人血清的比例，使αGal敲除的基因敲除猪的外周血单核细胞与人血清混合孵育3小时检测IgM，孵育6小时检测IgG。

2.根据权利要求1所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述αGal敲除的基因敲除猪是GGTA1敲除的基因敲除猪。

3.根据权利要求1所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述αGal敲除的基因敲除猪是GGTA1敲除的五指山猪。

4.根据权利要求1至3任意一项所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述人血清是混合的健康人血清。

5.根据权利要求1至3任意一项所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述孵育在4℃下进行。

6.根据权利要求1至3任意一项所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述孵育后，使用异种血清封闭，然后使用抗人的荧光标记的抗体孵育，再使用流式细胞仪检测外周血单核细胞上结合的IgM和/或IgG的水平。

7.根据权利要求6所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述异种血清是灭活的山羊血清。

8.根据权利要求6所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述抗人的荧光标记的抗体是异硫氰酸荧光素标记的山羊抗人IgG或IgM。

9.根据权利要求6所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述使用异种血清封闭是在4℃封闭20分钟。

10.根据权利要求6所述的人血清中非Gal异种抗体检测方法，其特征在于，所述使用抗人的荧光标记的抗体孵育是在4℃避光孵育30分钟。