[发明专利]一种生物垫料菌纳豆芽孢杆菌的生产工艺

权利要求书

1.一种生物垫料菌纳豆芽孢杆菌的生产工艺，其步骤如下：

(1)制备种子培养基，制备配方为：葡萄糖50g/L，酵母粉8g/L，蛋白胨8g/L，牛肉膏3g/L，植物复合发酵提取液5-8g/L，硫酸铵0.05g/L，NaCl 0.5g/L，磷酸二氢钠3g/L，硫酸镁0.02g/L；

所述植物复合发酵提取液的制备方法为：按照重量份，称取蒺藜10-15份，玫瑰5-8份，海底椰2份，鱼腥草1份，加入100份去离子水，保持煮沸20min，然后静置24小时，再用200目的滤布过滤，得到提取液以及药渣；将所得的药渣与去离子水按重量体积比1∶5加入去离子水，再次煮沸并保持沸腾50min，过滤，得到滤液；将两种滤液混合后，取5份混合滤液，1份去渣芒果皮汁混合，得到植物复合提取液；按照接种量3％接种罗伊乳酸杆菌，在恒温29℃下，低温发酵12-16小时，然后升温至80℃，灭活罗伊乳酸杆菌，得植物复合发酵提取液；

(2)种子培养，种子培养条件为：温度40℃，初始pH值为7.0，转速230r/min，装液量为40mL，接种量为5％v/v，发酵时间5-8h；

(3)制备发酵培养基：

配方：葡萄糖200-250g/L，麸皮2g/L、豆粕粉5g/L、NaCl0.8g/L、水苏糖0.5-0.8g/L、磷酸二氢钾3g/L、氯化钙32mg/L,植物复合发酵提取液2-3g/L，pH7.5；

(4)发酵培养，其发酵条件为：

快速发酵阶段：接种量为4％v/v，液量75％，低温32-35℃，培养时间18-20小时，期间充分供氧；

快速发酵期间分2次补加葡萄糖，控制补加后终浓度不高于20％；

芽孢诱导阶段：快速发酵后，臭椿萜酮按照终浓度5-8μg/L的浓度加入培养基，降温至10-15℃厌氧发酵2-3h以提高芽孢率。