[发明专利]利用蔬菜产区种养废弃物生产有机肥的菌剂的制备方法

权利要求书

1.利用蔬菜产区种养废弃物生产有机肥的菌剂的制备方法，包括以下步骤：

⑴将牛奶、红糖按10kg~20kg：1kg比例混合均匀，即得到溶液A；

⑵在所述溶液A中加入混合菌液，混合均匀后得到混合液；然后按每1L混合液添加无机盐1份，即得到溶液B；所述混合菌液与所述溶液A的比例为0.5kg~1kg：10kg~20kg；所述混合菌液是按下述方法制得：

①制备沼泽红假单胞菌纯培养菌种：按1g菌种沼泽红假单胞菌用10mL无菌水稀释，然后取1mL稀释液A接种于胰蛋白胨大豆琼脂斜面培养基上，37℃条件下培养6~24h，即得；所述胰蛋白胨大豆琼脂斜面培养基是指胰蛋白胨15.0g、大豆胨5.0g、氯化钠5.0g、琼脂15g溶于1L蒸馏水而得；

②制备褐球固氮菌纯培养菌种：按1g菌种褐球固氮菌用10mL无菌水稀释，然后取1mL稀释液B接种于固氮斜面培养基上，37℃条件下培养6~24h，即得；所述固氮培养基是指酵母提取物0.5g、甘露醇20.0g、磷酸二氢钾0.2g、磷酸氢二钾0.8g、硫酸镁0.2g，硫酸钙0.1g、琼脂15g溶于1L蒸馏水而得；

③制备放线菌纯培养菌种：按1g菌种放线菌用10mL无菌水稀释，然后取1mL稀释液C接种于酵母麦芽汁琼脂斜面培养基上，37℃条件下培养24~48h，即得；所述酵母麦芽汁琼脂斜面培养基是指葡萄糖4.0g、酵母膏4.0g、麦芽提取物10.0g、碳酸钙2.0g、琼脂12.0g溶于1L蒸馏水而得；

④制备白腐菌纯培养菌种：按1g菌种白腐菌用10mL无菌水稀释，然后取1mL稀释液D接种于马铃薯琼脂斜面培养基上，37℃条件下培养24~48h，即得；所述马铃薯琼脂斜面培养基是指马铃薯提取液1.0L、葡萄糖20.0g、琼脂15.0g混合而成；

⑤在透明容器中装1/2~2/3的溶液A，分别按所述溶液A体积的3~8%的接种量接种所述沼泽红假单胞菌纯培养菌种、褐球固氮菌纯培养菌种、放线菌纯培养菌种、白腐菌纯培养菌种，然后分别采用透气膜封口，并置于28℃~36℃、转速为180~220r/min的摇床上培养2~6天，当菌量达到200亿cfu/ml时，分别得到四种菌种扩增纯培养液；

⑥将所述四种菌种扩增纯培养液按1：1：1：1的重量比均匀混合后即得；

⑶在所述溶液B中加入玉米粉，搅拌均匀，即得水分含量为30%~45%的原料；所述溶液B、玉米粉的比例为1kg~3kg：7kg~9kg；

⑷将所述原料装入透明容器中，用透气膜封口，在光照充分条件下于28℃~36℃发酵1~3天，且每6~12h搅拌一次，当混合菌达到20~200亿cfu/g时，无菌条件下经干燥、粉碎、装袋，即得有机肥菌剂。

2.如权利要求1所述的利用蔬菜产区种养废弃物生产有机肥的菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤⑴中牛奶是指经过巴氏灭菌后的脱脂牛奶。

3.如权利要求1所述的利用蔬菜产区种养废弃物生产有机肥的菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤⑵中无机盐1份是由柠檬酸二钠2.0g、磷酸二氢钾2.0g、磷酸氢二钾2.0g、硫酸锰0.05g、碳酸钙20.0g组成。

4.如权利要求1所述的利用蔬菜产区种养废弃物生产有机肥的菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤⑶中玉米粉细度为80~100目。