[发明专利]一种水溶液中短链脂肪酸的分析方法及应用

说明书

本发明提供了一种水溶液中短链脂肪酸的分析方法及应用，其中方法包括，制备标准溶液后测定标准曲线，然后将待测样品过滤膜，进高效液相色谱分析，计算各组分含量。本发明提供的分析方法操作简便，也避免了气相色谱中甲酯化对样品成分改变和样品中原有脂肪酸酯对其干扰，方便快捷，可靠实用，可应用于油脂氧化产物检测领域。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种水溶液中短链脂肪酸的分析方法及应用。

背景技术

短链脂肪酸属于挥发性脂肪酸，为碳原子数1～6的有机脂肪酸主要包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸。短链脂肪酸包括甲酸，乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸，被后肠迅速吸收后，既储存了能量又降低了渗透压，并且短链脂肪酸对于维持大肠的正常功能和结肠上皮细胞的形态和功能具有重要作用。短链脂肪酸还可促进钠的吸收，丁酸在这方面的作用比乙酸和丙酸更强并且丁酸可增加乳酸杆菌的产量而减少大肠杆菌的数量。

油脂氧化过程生成短链脂肪酸，作为氧化二级产物生成后挥发构成油脂酸败哈喇味的一部分，以蒸馏水吸收裂解产物作为判定油脂劣化程度的指标之一。因此检测短链脂肪酸具有一定的必要性和实用性。关于短链脂肪酸的检测，国内外一般使用气相质谱联用方法，然而设备昂贵，检测费用高昂。此外也有报道气相色谱法检测短链脂肪酸，然而氢焰离子化检测器对甲酸的响应极为有限，无法实现检测目的。因此，亟待需要找到一种高效检测能够在水溶液中分析多种短链脂肪酸的分析方法。

发明内容

本部分的目的在于提供一种检测水溶液中短链脂肪酸的反向高效液相色谱分析方法以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述和/或现有短链脂肪酸检测中存在的问题，提出了本发明。

因此，本发明的其中一个目的是解决现有技术中的不足，提供一种保留时间短，色谱图的质量高的水溶液中短链脂肪酸的高效液相分析方法。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种水溶液中短链脂肪酸的分析方法，包括，制备标准溶液后测定标准曲线，然后将待测样品过滤膜，进高效液相色谱分析，计算各组分含量。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中： 所述高效液相色谱分析，其中，流速为1.0～3.0mL/min，柱温为35～45℃，进样量为10～100μL，流动相A包括磷酸二氢钾缓冲溶液，流动相B包括甲醇。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中：所述高效液相色谱分析，其洗脱方式为梯度洗脱，其是先以磷酸二氢钾：甲醇＝80～95：5～20为起点，做7min等浓度淋洗，然后线性增大甲醇浓度，10～20min时达到磷酸二氢钾：甲醇＝60～80：20～40，25～35min时以磷酸二氢钾：甲醇＝60～80：20～40做等浓度淋洗，以上比例均为体积比。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中：所述制备标准溶液，其是分别称取甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸用蒸馏水定容并形成不同浓度梯度，得到短链脂肪酸标准溶液。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中：所述高效液相色谱分析，其色谱柱选用C18柱，C18柱规格为φ4.6mm×150mm，5μm。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中：所述滤膜规格为0.3～0.6μm。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中：所述磷酸二氢钾缓冲溶液浓度为0.04～0.10mol/L，并用磷酸调节pH为2～3。

作为本发明所述水溶液中短链脂肪酸的分析方法的一种优选方案，其中：所述甲醇为色谱纯甲醇。