[发明专利]声学生物反应器方法

权利要求书

1.一种从细胞培养物连续收集细胞的方法，包括：

将细胞培养物悬浮在生物反应器的生长容积中，所述生物反应器包括至少一个超声换能器以及位于所述至少一个超声换能器对面的反射器，驱动每个超声换能器以产生将细胞培养物保持在生长容积中的多维声驻波；以及

使营养物流体流流经细胞培养物以从细胞培养物中取出细胞；以及

将取出的细胞与营养物流体流分离。

2.权利要求1的方法，其中所述细胞培养物由T细胞、遗传修饰的T-细胞、B细胞或者NK细胞组成。

3.权利要求1的方法，其中所述取出的细胞在外部过滤装置中与营养物流体流分离，从产物出口回收分离的细胞，并且营养物流体流通过再循环出口离开外部过滤装置。

4.权利要求1的方法，其中所述生物反应器还包括位于生长容积和生物反应器出口之间的二级过滤系统。

5.权利要求4的方法，如果多维声驻波失灵，则进一步包括激活二级过滤系统。

6.权利要求1的方法，其中所述多维声驻波是共振的。

7.权利要求1的方法，其中所述至少一个超声换能器是元件阵列。

8.权利要求1的方法，其中每个超声换能器产生多个多维声驻波。

9.权利要求1的方法，其中所述生物反应器在生长容积内不包括叶轮。

10.权利要求1的方法，其中所述多维声驻波具有相同数量级的轴向力分量和横向力分量。

11.权利要求1的方法，其中所述超声换能器包括可以以更高阶振型振动的压电材料。

12.权利要求11的方法，其中所述压电材料具有矩形形状。

13.权利要求1的方法，其中所述超声换能器包括：

具有顶端、底端和内部容积的壳体；和

位于壳体底端的晶体，其具有暴露的外表面和内表面，所述晶体在电压信号驱动时能够振动。

14.权利要求13的方法，其中背衬层与晶体的内表面接触，所述背衬层由基本上声学透明的材料制成。

15.权利要求14的方法，其中所述基本上声学透明的材料是轻木、软木或者泡沫。

16.权利要求14的方法，其中所述基本上声学透明的材料具有高达1英寸的厚度。

17.权利要求14的方法，其中所述基本上声学透明的材料为格子形式。

18.权利要求13的方法，其中所述晶体的外表面被具有半波长或更小厚度的耐磨表面材料覆盖，所述耐磨表面材料为氨基甲酸乙酯、环氧树脂或硅氧烷涂层，或者由氧化铝制成。

19.权利要求13的方法，其中所述晶体不具有背衬层或者耐磨层。

20.权利要求1的方法，其中所述多维声驻波是三维驻波。

21.一种制备来自患者的CAR T-细胞的方法，包括：

将细胞培养物悬浮在生物反应器的生长容积中，所述生物反应器包括至少一个超声换能器以及位于所述至少一个超声换能器对面的反射器，驱动每个超声换能器以产生将细胞培养物保持在生长容积中的多维声驻波，其中所述细胞培养物由已从患者中移出并遗传修饰成CAR T细胞的T-细胞形成。