[发明专利]多能细胞的衍生和自我更新及其用途

权利要求书

1.用于培养间充质干细胞(MSC)和/或可从间充质级份获得的细胞的方法，所述方法包括在(i)至少一种包含α5链的层粘连蛋白和/或(ii)至少一种包含α4链的层粘连蛋白的存在下在低氧条件下培养MSC和/或来自间充质级份的细胞。

2.根据权利要求1的方法，其中所述至少一种包含α4链的层粘连蛋白占总层粘连蛋白的至少50％(w/w)，优选占层粘连蛋白的至少70％。

3.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述方法用于衍生多能祖细胞，例如心脏祖细胞。

4.根据权利要求3的方法，其中在至少一种激活Wnt经典途径的试剂存在下培养所述MSC和/或所述来自间充质级份的细胞。

5.可通过权利要求3-4中任一项的方法获得的多能祖细胞，其中所述祖细胞表达PDGFR-α和/或HLA-G。

6.将多能祖细胞，任选地根据权利要求5的多能祖细胞分化成心脏细胞(cardiaccell)的方法，所述方法包括在选自下组的至少一种层粘连蛋白存在下培养多能祖细胞的步骤：层粘连蛋白111、层粘连蛋白121、层粘连蛋白211、层粘连蛋白221及其任何组合。

7.可通过权利要求6的方法获得的心脏细胞，其特征在于：

(i)所述心脏细胞表达α-辅肌动蛋白、肌钙蛋白T和肌钙蛋白I；并且

(ii)所述心脏细胞以每分钟40-100次跳动自发跳动。

8.心脏祖细胞，任选地可通过权利要求3-4的方法获得，其中所述心脏祖细胞的特征在于它们对于下列至少一种呈阳性：Isl1、Sox2、SSEA1、Nanog、Tra-1、Brachyury T、CXCR4、PDGFRα和HLA-G。

9.根据权利要求8的心脏祖细胞，其中所述细胞表达CXCR4并且在缺血性心脏组织中以延长的方式排列。

10.MSC、可从间充质级份获得的细胞、祖细胞、心脏祖细胞或心脏细胞，其特征在于所述细胞由选自下组的至少一种外源衍生的层粘连蛋白包被：LN-511、LN-521、LN-421、LN-411、LN-111、LN-121、LN-221、LN-211。

11.组合物和/或试剂盒，其包含：

(i)至少一种包含α5链的层粘连蛋白；和，

(ii)至少一种包含α4链的层粘连蛋白。

12.根据权利要求11的组合物和/或试剂盒，其还包含至少一种激活Wnt经典途径的试剂。

13.根据权利要求11-12中任一项的组合物和/或试剂盒，其还包含至少一种激活Wnt经典途径的试剂。

14.根据权利要求11-13中任一项的组合物和/或试剂盒，其还包含选自下组的至少一种层粘连蛋白：层粘连蛋白111、层粘连蛋白211、层粘连蛋白221及其任何组合，优选所述至少一种层粘连蛋白包含在分开的容器中或适合于细胞培养的分开表面上。

15.根据权利要求5和7-10中任一项的细胞，其用于药物。