[发明专利]利用由物理刺激引起的环境流入的细胞重编程方法

权利要求书

1.一种细胞的重编程方法，其特征在于，包括：

向分化细胞或未分化细胞与培养基的混合物提供能够促进环境流入的物理刺激的步骤，

将接受上述物理刺激的混合物培养规定时间来获得重编程的细胞的步骤。

2.根据权利要求1所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述环境流入包含：来自接受物理刺激的分化细胞或未分化细胞的遗传物质、化学物质、小分子、外泌体或包含外泌体的细胞外囊泡；或者培养基成分的细胞内流入。

3.根据权利要求1所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述物理刺激为超声波、激光、磁场、等离子体、发光二极管、电刺激、化学性暴露、热处理或酸处理中的一种。

4.根据权利要求1所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述分化细胞或未分化细胞为体细胞、癌细胞、器官组织细胞、诱导性多能干细胞或胚胎干细胞中的一种。

5.根据权利要求1所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述重编程的细胞为多能细胞；或者是肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞、神经细胞、星形胶质细胞、角质细胞、毛囊细胞、胰腺β细胞或心肌细胞的分化细胞中的一种，上述分化细胞或未分化细胞以及重编程的细胞具有不同的细胞表型。

6.根据权利要求5所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述多能细胞为用于表达Oct3/4、SOX2、NANOG、c-MYC、KLF4、TDGF1、SSEA4、TRA-1-60、PAX6、巢蛋白、鼠短尾突变体表型、SMA、GATA4或AFP中的一种的多能性标记基因或者三胚层标记基因的细胞。

7.根据权利要求5所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述分化细胞为用于表达PAX6、巢蛋白、Soxl、Sox2、MAP2、TuJl、GFAP或O4中的一种的神经细胞；用于表达结蛋白、辅肌动蛋白、Pax3、SMA、GATA4或NKX2-5中的一种的肌肉细胞；用于表达AFP、HNFla、HNF4a、CK18或ALB中的一种的肝细胞；或者能够进行油红O染色且用于表达Pparc2、C/ebpa、aP2或Fabp4中的一种的脂肪细胞中的一种。

8.根据权利要求1所述的细胞的重编程方法，其特征在于，上述培养基为干细胞培养基、专能干细胞诱导分化培养基、成肝细胞诱导分化培养基、成骨诱导分化培养基、脂肪细胞诱导分化培养基、肌肉细胞诱导分化培养基、星形胶质细胞诱导分化培养基、神经元细胞诱导分化培养基、血管内皮细胞诱导分化培养基、角质细胞诱导分化培养基、胰腺β细胞诱导分化培养基或心肌细胞诱导分化培养基中的一种。

9.根据权利要求1或3所述的细胞的重编程方法，其特征在于，还包括在对培养基以及分化细胞或未分化细胞进行混合之前在输出强度为lW/cm²至20W/cm²的条件下对培养基进行超声波处理1分钟至20分钟的步骤。

10.根据权利要求1或3所述的细胞的重编程方法，其特征在于，对于培养基以及分化细胞或未分化细胞的混合物的超声波处理在输出强度为0.5W/cm²至3W/cm²的条件下进行1秒钟至5秒钟。

11.根据权利要求1或3所述的细胞的重编程方法，其特征在于，还包括在对培养基以及分化细胞或未分化细胞进行混合之前利用波长范围为300nm至900nm的脉冲激光束对培养基进行照射1分钟至20分钟的步骤。

12.根据权利要求1或3所述的细胞的重编程方法，其特征在于，在对于培养基以及分化细胞或未分化细胞的混合物的激光处理中，利用波长范围为300nm至900nm的射脉冲激光束照射1秒钟至10秒钟。