[发明专利]采用寡核苷酸介导的基因修复提高靶向基因修饰的效率的方法和组合物在审

专利信息
申请号: 201680084442.6 申请日: 2016-09-16
公开(公告)号: CN109072248A 公开(公告)日: 2018-12-21
发明(设计)人: P·R·比瑟姆;G·F·W·格卡尔;C·施波克;N·萨奥尔;J·皮尔斯;R·E·塞格米;J·莫左鲁克 申请(专利权)人: 希博斯美国有限公司;希博斯欧洲有限公司
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N5/10;A01H5/00;A01H6/20
代理公司: 北京市铸成律师事务所 11313 代理人: 郗名悦;屈小春
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 基因修复 寡核苷酸 修饰 哺乳动物细胞 可用性 靶向基因 修饰细胞 靶细胞 真菌 靶向 介导 酵母 藻类 细菌
【权利要求书】:

1.一种引起植物细胞中的遗传变化的方法,所述方法包括使所述细胞暴露于DNA切割体和修饰的GRON。

2.一种植物细胞,其包含DNA切割体和修饰的GRON。

3.一种引起植物细胞中的遗传变化的方法,所述方法包括使所述细胞暴露于DNA切割体和包含DNA和/或RNA的GRON。

4.一种植物细胞,其包含DNA切割体,所述DNA切割体包含DNA和/或RNA和/或蛋白质。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述DNA切割体是选自CRISPR、TALEN、锌指、大范围核酸酶以及DNA切割抗生素的一种或多种。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述DNA切割体是CRISPR或TALEN。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述DNA切割体是CRISPR。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述DNA切割体是TALEN。

9.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述DNA切割体是选自由以下各项组成的组的一种或多种DNA切割抗生素:博来霉素、博莱霉素(zeocin)、腐草霉素、他利霉素以及培洛霉素。

10.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述DNA切割体是博莱霉素(zeocin)。

11.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON是单链的。

12.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON是化学保护的寡核苷酸。

13.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述5’端受保护的化学保护的寡核苷酸。

14.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述3’端受保护的化学保护的寡核苷酸。

15.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述5’和3’端受保护的化学保护的寡核苷酸。

16.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含选自Cy3基团、3PS基团和2’-O-甲基的一个或多个。

17.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON具有Cy3基团。

18.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含两个或更多个Cy3基团。

19.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述5’端上的所述第一(最后)碱基处的Cy3基团。

20.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述5’端上的所述第一(最后)碱基处的idC基团。

21.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述3’端上的所述第一(最后)碱基处的Cy3基团。

22.如前述权利要求中任一项所述的方法或细胞,其中所述GRON包含在所述3’端上的所述第一(最后)碱基处的idC基团。

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