[发明专利]用于治疗视网膜病的组合物和方法

说明书

本发明提供了用于治疗视网膜病的方法，所述方法包括向对象施用有效量的Na/K ATP酶/Src受体复合物的多肽拮抗剂。所述视网膜病可包括糖尿病性视网膜病。本发明还提供了减少视网膜脉管系统中血管生成的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用、例如通过玻璃体内注射来施用Na/K ATP酶/Src受体复合物的多肽拮抗剂的步骤。

相关申请

本申请要求2015年12月30日提交的美国临时申请序列号62/273,224的优先权，其全部公开内容通过该引用并入本文中。

政府利益

本发明是在国立卫生研究院(National Institute of Health)授予的资助号HL109015下由政府支持完成的。政府在本发明中享有一定权利。

技术领域

本公开的主题涉及用于治疗视网膜病和/或减少视网膜脉管系统中血管生成的组合物和方法。特别地，本公开的主题涉及多肽和利用所述多肽治疗视网膜病和/或减少视网膜脉管系统中血管生成的方法。

背景技术

Na/K-ATP酶在大多数真核细胞中普遍表达，并通过将Na⁺泵出细胞和将K⁺泵入细胞来帮助维持跨膜离子梯度。Na/K-ATP酶经由至少两个结合基序直接与Src相互作用：一个位于α1亚基的CD2和Src SH2之间；而另一个涉及第三胞质结构域(CD3)和Src激酶结构域。这种Na/K-ATP酶和Src复合物的形成充当乌本苷(ouabain)的受体以激发蛋白激酶级联。具体地，乌本苷与Na/K-ATP酶的结合将破坏后者的相互作用，然后导致不同途径的组装和激活，所述途径包括ERK级联、PLC/PKC途径和ROS产生。此外，这种相互作用使Src保持在非活性状态。因此，Na/K-ATP酶起到内源性负Src调节剂的功能。还参见国际专利申请号WO 2008/054792和WO 2010/071767，二者都通过引用并入本文。

Src家族激酶是52-62-kDa膜相关非受体酪氨酸激酶，并且它们响应各种细胞外配体，参与几种酪氨酸磷酸化相关的信号传导途径。例如，Src含有至少三个蛋白质相互作用结构域。SH3结构域与多聚脯氨酸基序结合，并且SH2结构域与磷酸化酪氨酸残基相互作用。所述激酶结构域与核苷酸反应并使底物磷酸化。蛋白质配体与SH3或SH2结构域的结合可以激活Src。还报道了与Src的激酶结构域结合的蛋白质能够调节Src活性。

还应理解，Na+/K+-ATP酶与Src和Src家族激酶相互作用而形成功能性受体。乌本苷与该受体的结合激活Src，Src进而使各种效应物磷酸化，导致不同途径包括Ras/Raf/ERK1/2和磷酸酶C/蛋白激酶C级联的组装和活化，以及细胞内Ca²⁺和细胞ROS产生增加。这些信号传导途径的激活最终导致改变心脏和肾脏功能、刺激细胞增殖和组织纤维化、保护组织抵抗缺血/再灌注损伤、抑制癌细胞生长等等。Src和ROS也参与VEGF表达的诱导。虽然许多已知的Src和Src家族激酶抑制剂被开发为ATP类似物，同ATP竞争与这些激酶的结合，但这样的Src抑制剂缺乏途径特异性。

另外，许多类型的视网膜病是增殖性的，最经常由新生血管化(neovascularization)或血管过度生长引起。血管生成是可能导致失明或严重视力丧失的视网膜病的前兆。糖尿病性视网膜病(DR)是糖尿病的并发症，并且是发达国家中工作年龄成人失明的主要原因。2012年全世界有超过3.71亿糖尿病患者，并且这一数字正在迅速增加。该疾病由高葡萄糖诱导的血管功能障碍和重塑引发。随后因为VEGF和其他生长因子的产生增加引起组织缺血/缺氧和后续的血管生成(新生血管化)，导致增生性糖尿病性视网膜病(PDR)。此外，在糖尿病性视网膜病的病理条件下，ROS增加和Src激活是VEGF介导的内皮细胞增殖和血管渗漏的关键，VEGF介导的内皮细胞增殖和血管渗漏是糖尿病新生血管化的病理基础。由于组织纤维化，DR可进一步发展为视网膜表面上的纤维血管增生，引起视网膜脱离。