[发明专利]能够产生支链化合物的经修饰硫解酶及其用途

权利要求书

1.突变硫解酶，其能够催化通过式(II)化合物与式(III)化合物的缩合形成式(I)化合物，

其中R₁和R₂独立地选自直链或支链C₁-C₆烷基、直链或支链C₂-C₆烯基、直链或支链C₂-C₆炔基、芳基、芳基-烷基和苄基，并且S-CoA是辅酶A，

所述突变硫解酶至少具有在对应于SEQ ID NO：1的多肽中的第293位的位置处的突变，其中所述硫解酶显示出与选自SEQ ID NO：1、2、3或4的硫解酶至少75％的序列同一性，前提是所述硫解酶不是由序列SEQ ID NO：7或SEQ ID NO：8组成的硫解酶。

2.根据权利要求1所述的硫解酶，其中所述硫解酶中对应于在Prosite数据库中具有登录号PS00098的硫解酶标识的序列与对应于SEQ ID NO：1的多肽中的所述标识的序列具有至少35％的同一性，其中所述硫解酶中对应于在Prosite数据库中具有登录号PS00737的硫解酶标识的序列与对应于SEQ ID NO：1的多肽中的所述标识的序列具有至少50％的同一性，和/或其中所述硫解酶中对应于在Prosite数据库中具有登录号PS00099的硫解酶标识的序列与对应于SEQ ID NO：1的多肽中的所述标识的序列具有至少25％的同一性。

3.根据权利要求2所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶选自：

(i)SEQ ID NO：1的多肽，其中所述至少一个突变位于位置Phe293处，

(ii)SEQ ID NO：2的多肽，其中所述至少一个突变位于位置Met290处，

(iii)SEQ ID NO：3的多肽，其中所述至少一个突变位于位置Met289处，以及

(iv)SEQ ID NO：4的多肽，其中所述至少一个突变位于位置Met294处。

4.根据权利要求3所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶是SEQ ID NO：1的多肽，其中位于位置Phe293处的所述至少一个突变选自Phe293Asp、Phe293Ala、Phe293Ser、Phe293Gly和Phe293Glu。

5.根据权利要求3所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶是SEQ ID NO：2的多肽，其中在位置Met290处的所述至少一个突变选自Met290Asp、Met290Ala、Met290Ser、Met290Gly和Met290Glu。

6.根据权利要求5所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶是SEQ ID NO：2的多肽，其中在位置Met290处的所述至少一个突变选自Met290Asp和Met290Ala。

7.根据权利要求3所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶是SEQ ID NO：3的多肽，其中位于位置Met289处的至少一个突变选自Met289Asp、Met289Ala、Met289Ser、Met289Gly和Met289Glu。

8.根据权利要求7所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶是SEQ ID NO：3的多肽，其中位于位置Met289处的至少一个突变选自Met289Asp和Met289Ala。

9.根据权利要求3所述的硫解酶，其中所述突变硫解酶是SEQ ID NO：4的多肽，其中位于位置Met294处的所述至少一个突变选自Met294Asp、Met294Ala、Met294Ser、Met294Gly和Met294Glu。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的硫解酶，其还包含在选自对应于SEQ ID NO：1的多肽中的第90和383位的残基的位置处的至少一个另外的突变。