[发明专利]惯性液滴的生成和颗粒的包封在审
| 申请号: | 201680071676.7 | 申请日: | 2016-11-09 |
| 公开(公告)号: | CN108367291A | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
| 发明(设计)人: | 哈默德·阿米尼;阿拉什·贾姆什迪;塔伦·库马尔·库拉纳;福特·马沙耶希;吴仪宣 | 申请(专利权)人: | ILLUMINA公司 |
| 主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;B01J19/00 |
| 代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人: | 王达佐;洪欣 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 微珠 液滴 微流体装置 细胞 单个细胞 流体液滴 微球体 包封 | ||
1.生成包含两种或更多种类型颗粒的液滴的方法,所述方法包括:
将其中悬浮有微珠的微珠流体聚集到第一微通道内的第一有序微珠流中;
将其中悬浮有细胞的细胞流体聚集到第二微通道内的第二有序细胞流中;以及
将第一有序流与第二有序流合并,以形成在每个液滴内具有预定数量的细胞和微珠的多个液滴。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述第一微通道具有最小横截面尺寸D,并且所述微珠具有至少约0.1D的横截面尺寸。
3.如权利要求2所述的方法,其中所述细胞具有至少约0.1D的横截面尺寸。
4.如权利要求2所述的方法,其中所述第一有序流与第二有序流合并包括使第一有序流和第二有序流与在第一流体和第二流体中不混溶的第三流体接触。
5.如权利要求1所述的方法,其中聚集微珠包括使微珠通过第一微通道的第一惯性聚集部分。
6.如权利要求1所述的方法,其中聚集细胞包括使细胞通过第二微通道的第二惯性聚集部分。
7.如权利要求1所述的方法,其中聚集微珠包括使微珠通过第一微通道的第一惯性聚集部分,并且其中聚集细胞包括使细胞通过第二微通道的第二惯性聚集部分。
8.如权利要求7所述的方法,其中所述第一微通道的第一惯性聚集部分和所述第二微通道的第二惯性聚集部分中的至少一个具有弯曲区域。
9.如权利要求8所述的方法,其中每个弯曲区域独立地为S形、C形、正弦曲线形或螺旋形。
10.如权利要求1所述的方法,其中所述微珠包含核苷酸片段。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述核苷酸片段包含条码区域、索引区域和捕获区域。
12.如权利要求11所述的方法,其中每个核苷酸片段的条码区域长度为至少约6个核苷酸。
13.如权利要求11所述的方法,其中每个核苷酸片段的索引区域长度为至少约4个核苷酸。
14.如权利要求11所述的方法,其中所述捕获区域包含聚胸腺嘧啶核苷酸且长度为至少约10个核苷酸。
15.如权利要求1所述的方法,其中细胞的预定数量是一个,并且微珠的预定数量是一个。
16.如权利要求15所述的方法,
其中每个微珠具有至少约1的雷诺数,
其中微珠的雷诺数被定义为
其中ρ是微珠流体的密度,Um是微珠流体的最大流速,H是微珠流体的水力直径,以及μ是微珠流体的动力粘度,
其中每个细胞具有至少约1的雷诺数,并且
其中细胞的雷诺数被定义为
其中ρ是细胞流体的密度,Um是细胞流体的最大流速,H是细胞流体的水力直径,以及μ是细胞流体的动力粘度。
17.如权利要求16所述的方法,其中包含k1个微珠和k2个细胞的多个液滴的比率大于(λ1k1exp(-λ1)/(k1!))(λ2k2exp(-λ2)/(k2!)),其中λ1是每个液滴的平均微珠数量,λ2是每个液滴的平均细胞数量。
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