[发明专利]用于生长或检测微生物的化学成分确定的培养基

说明书

本发明涉及用于检测范围广泛的微生物的化学成分确定的培养基，其包含至少一种渗透保护剂化合物和至少一种脂肪酸。

本发明涉及用于检测范围广泛的微生物的包含至少一种渗透保护剂化合物和至少一种脂肪酸的化学成分确定的培养基（chemically defined culture medium）。

自十九世纪以来，称为复合培养基的通用培养基已可用于生长和培养细菌、酵母和霉菌。自此以来，制造这些培养基的方法和所用的主要组分在其基本性质方面出乎意料地几无改变。这些微生物培养基的主要基础是它们所含有的蛋白胨。

存在的蛋白胨被设计为以允许多种多样的细菌、酵母和霉菌生长的组合和浓度存在。由此，这些蛋白胨的混合物是在生物化学方面丰富且均衡的营养物来源，并通常通过添加盐、缓冲剂和优化快速生长所必需的其它原材料来补充。此外，该培养基的固体形式通常易溶于水。在溶解后，该培养基是可灭菌的，并可以在适当方便的容器中提供以防止污染，但同时在用原核和/或真核细胞接种后允许在氧气中（如果需要的话）。随后，含有培养基和细胞的容器在适当温度下孵育以允许细胞生长。

但是，仅由熟悉本领域的经验丰富的人员慎重选择蛋白胨类型才能产生具有在其生物化学组成方面足够宽且足够平衡的营养基础的适当培养基，以便能够培养非常宽范围的原核生物以及真核生物。蛋白胨品质因蛋白胨类型而异，在相同蛋白胨的不同制造商之间不同，在相同制造商的不同等级之间不同，甚至在来自一个制造商的相同等级的不同批次之间也显著不同。但是，对这种变化的品质的生物化学性质知之甚少，尤其是在批次之间的变化水平上。但是，生物化学变化当然一部分是由于所用天然原材料的品质变化。因此，由于此类原材料中的营养缺乏或营养不平衡，并非所有批次的蛋白胨都适用于特定的培养基配方，因此各批次必须小心地选择以便能够生长多种原核生物和真核生物，即支持多种细菌、酵母和霉菌的可接受的生长。

蛋白胨的确切组成是未知的。这意味着对此类天然原材料提供的促进细胞生长的关键营养因素有所了解但不充分。例如，知之甚少和同样难以控制是培养基中此类原材料的负面物理-化学相互作用，这导致其沉淀。除了通常存在于传统培养基中的盐、缓冲剂和其它组分之外，当一种蛋白胨与其它蛋白胨类型混合时，问题的复杂性提高。制造均衡的通用生长培养基是试验、错误和长期经验的问题。添加的个别蛋白胨的批次间变化必须充分控制，以使得不适于产生测试原核（细菌）和真核（酵母和真菌）菌株的全范围期望细胞生长的批次——无论单独还是与其它蛋白胨类型组合——可以从制造此类培养基的生产过程中消除。

即使在这些措施之后，用于生长范围非常广泛的细胞株的此类通用培养基不一定具有充分的生物化学平衡或营养以生长在通常用于证实培养基适于环境监控应用的宽幅试验板中测试的所有细菌、酵母和真菌菌株。一方面，某些细胞类型对该培养基中提供的生物化学物质的正确平衡非常敏感。另一方面和此外，特别是非常苛刻的细胞需要额外的补充剂，如新鲜的血液或血液提取物来提高它们的生长性能。即使这些培养基对于某些非常苛刻的细胞类型不具有足够的营养组成，需要进一步添加补充剂（一种或多种）来支持生长或加速生长以使其有效用于通常在环境样品中发现的多种多样的原核和真核细胞。

最近开发了化学成分确定的细胞培养基。但是，迄今为止，用于微生物培养的化学成分确定的培养基的生产商集中于支持原核生物（例如细菌）或真核生物（例如酵母或真菌或昆虫或哺乳动物细胞）的生长。

WO 2007/135385例如公开了用于生长细菌，尤其是奈瑟氏菌属的化学成分确定的培养基。

GB 2464203公开了用于计数弯曲菌属的化学成分确定的培养基。

本发明的目的由此是提供基于化学成分确定的原材料的细胞培养基，其提供了生长可以与例如公知的蛋白胨和/或基于提取物的培养基相比的范围非常广泛的微生物（如原核生物以及真核生物物种）的基础，覆盖生长通常在各种样品（如环境样品、来自食品和饮料行业的样品、药物样品或临床样品）中发现的原核和真核细胞的需要。