[发明专利]经遗传修饰的细胞及其用途

权利要求书

1.编码嵌合抗原受体(CAR)的核酸，其中所述CAR包含抗原识别部分、铰链区、跨膜结构域和T细胞活化部分，其中：

(1)所述抗原识别部分与所述T细胞活化部分可操作地连接，并包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列；

(2)所述铰链区选自CD8铰链和CD28铰链；

(3)所述跨膜结构域选自CD8跨膜结构域或CD28跨膜结构域；和

(4)所述T细胞活化部分包含

(a)选自4-1BB信号传导结构域和CD28信号传导结构域的信号传导结构域；和

(b)TCR zeta信号传导结构域。

2.T细胞，其包含如权利要求1所述的核酸。

3.权利要求2所述的T细胞，其中所述T细胞表达至少一种纯合HLA单倍型。

4.权利要求2或权利要求3中任一项所述的T细胞，其中所述T细胞表达

(i)针对第一抗原决定簇的T细胞受体(TCR)，和

(ii)CAR，所述CAR包含针对第二抗原决定簇的抗原识别部分和T细胞活化部分，其中所述CAR由权利要求1所述的核酸编码。

5.权利要求4所述的T细胞，其中所述T细胞表达非信号传导抗原结合受体，所述非信号传导抗原结合受体包含针对第三抗原决定簇的抗原识别部分。

6.权利要求5所述的T细胞，其中所述第一抗原决定簇、所述第二抗原决定簇和所述第三抗原决定簇彼此不同。

7.权利要求4所述的T细胞，其中所述第一抗原决定簇选自肿瘤抗原。

8.权利要求4所述的T细胞，其中所述CAR中的抗原识别部分通过铰链区和跨膜结构域与所述T细胞活化部分可操作地连接，其中所述铰链区任选地包含促进所述CAR二聚化的半胱氨酸。

9.权利要求5所述的T细胞，其中所述非信号传导抗原结合受体包含针对CD47的抗原识别部分。

10.权利要求9所述的T细胞，其中所述非信号传导抗原结合受体的抗原识别部分通过铰链区与跨膜区可操作地连接。

11.权利要求10所述的T细胞，其中所述铰链区包含促进二聚化的半胱氨酸残基。

12.权利要求10所述的T细胞，其中所述非信号传导抗原结合受体不形成二聚体。

13.权利要求2-12中任一项的T细胞在制备用于治疗选自新生物状况、微生物感染或自身免疫病症的状况的药物中的用途。

14.权利要求13的用途，其中所述微生物感染选自HIV感染、STD感染或抗生素抗性细菌感染。

15.制备经遗传修饰的哺乳动物干细胞的方法，其包括：

将权利要求1所述的核酸引入哺乳动物干细胞，其中所述哺乳动物干细胞能够分化为表达针对第一抗原决定簇的TCR的T细胞。

16.制备T细胞的方法，其包括：

提供根据权利要求15的方法可获得的经遗传修饰的干细胞，和

使所述遗传修饰的干细胞分化为T细胞。