[发明专利]用于免疫治疗的FLT3定向CAR细胞

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含：(a)FLT3抗体的抗原结合结构域；(b)铰链结构域；(c)跨膜结构域；(d)和细胞内结构域。

2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体(CAR)，其包含：(a)FLT3抗体的抗原结合结构域；(b)铰链结构域；(c)CD28跨膜结构域；(d)选自CD28共刺激信号传导区域、4-1BB共刺激信号传导区域、ICOS共刺激信号传导区域和OX40共刺激区域的一个或多个共刺激区域；和(e)CD3ζ信号传导结构域。

3.如权利要求1或2所述的CAR，其中所述FLT3抗体的抗原结合结构域包含FLT3重链可变区和FLT3轻链可变区。

4.如权利要求3所述的CAR，其进一步包含位于FLT3重链可变区和FLT3轻链可变区之间的接头多肽。

5.如权利要求4所述的CAR，其中所述FLT3重链可变区包含由SEQ ID NO:21至23、SEQID NO:29至31或其等效物中的任一种编码的氨基酸序列。

6.如权利要求3至5中任一项所述的CAR，其中所述FLT3轻链可变区CDR区包含由SEQ IDNO:24至26、SEQ ID NO:32至34或其等效物中的任一种编码的氨基酸序列。

7.如权利要求4至6中任一项所述的CAR，其中所述接头多肽包含含有序列(GGGGS)n的多肽，其中n是1至6的整数。

8.如前述权利要求中任一项所述的CAR，其还包括附接至所述CAR的可检测标记或纯化标记。

9.如权利要求5至8中任一项所述的CAR，其中等效物包括与由多核苷酸编码的CAR或多肽具有至少80％氨基酸同一性的多肽，所述多核苷酸在高严格性条件下与编码所述CAR的多核苷酸的补体杂交，其中高严格性条件包括约55℃至约68℃的培育温度；约1×SSC至约0.1×SSC的缓冲液浓度；约55％至约75％的甲酰胺浓度；以及约1×SSC、0.1×SSC的洗涤溶液或去离子水。

10.一种编码如权利要求1至9中任一项所述的CAR的分离的核酸序列或其补体或其各自的等效物，其中等效物具有与多核苷酸或其补体、或在高严格性条件下与编码所述CAR的分离核酸的多核苷酸或补体杂交的多核苷酸至少80％序列同一性，其中高严格性条件包括约55℃至约68℃的培育温度；约1×SSC至约0.1×SSC的缓冲液浓度；约55％至约75％的甲酰胺浓度；以及约1×SSC、0.1×SSC的洗涤溶液或去离子水。

11.如权利要求10所述的分离的核酸，其还包含位于编码所述FLT3抗体的抗原结合结构域的多核苷酸上游的编码启动子的多核苷酸序列。

12.如权利要求11所述的分离的核酸，其中所述编码启动子的多核苷酸序列选自CMV启动子、MND启动子或EF1α启动子。

13.如权利要求10至12中任一项所述的分离的核酸，其还包含位于编码所述FLT3抗体的抗原结合结构域的多核苷酸上游或下游的编码iCasp的多核苷酸序列。

14.如权利要求13所述的分离的核酸，其中所述编码iCasp的多核苷酸序列是SEQ IDNO:40。

15.如权利要求10至14中任一项所述的分离的核酸，其还包含位于编码所述FLT3抗体的抗原结合结构域的多核苷酸上游的编码2A肽(T2A)的多核苷酸序列。

16.如权利要求15所述的分离的核酸，其中所述编码2A肽的多核苷酸序列是SEQ IDNO:41。