[发明专利]从含有核酸的样品中分离核酸的方法及用于该方法的装置

说明书

本发明的课题在于提供不需要特殊的机器从含有核酸的样品中有效率地将核酸分离的方法及用于该方法的装置。本发明的方法使用下述装置，其具备收纳有使核酸游离的处理试剂(101)的处理试剂收纳容器(100)和具有核酸吸附性载体(205)的核酸采集构件(200)的装置，在处理试剂收纳容器(100)上安装有盖体(104)，并按照在将处理试剂收纳容器(100)与核酸采集构件(200)连接时、由盖体(104)进行密封开放、将释放口(102)与处理试剂供给口(204)连通的方式构成；所述方法包含以下工序：工序1：将样品收纳在核酸采集构件(200)中；工序2：将处理试剂收纳容器(100)与核酸采集构件(200)连接并使其连通；工序3：将样品与处理试剂混合形成混合物(421)，使核酸游离；工序4：在将混合物(421)通至载体(205)的同时将其排出，吸附核酸。

技术领域

本发明涉及从生物体试样等含有核酸的样品中分离核酸的方法。本发明还涉及用于从含有核酸的样品中分离核酸的装置。

背景技术

基因检查通过对核酸进行解析，能够高灵敏度且在短时间内对结果进行判定，是在医疗、农畜水产、品质检查等多种领域中应用的产业上重要的检查方法。为了该检查，需要从样品中对核酸进行洗脱、精制，作为核酸精制法，最为常用的是应用了在促溶剂的存在下、核酸与核酸吸附性载体相结合的性质的结合-洗脱法(专利文献1、2)。该精制法由所下述工序构成：(a)溶解工序：样品的溶解和核酸的溶解析出、(b)吸附工序：核酸吸附性载体与核酸的结合、(c)洗涤工序：结合于核酸吸附性载体的核酸的洗涤、(d)溶解析出工序：核酸的溶解析出；特别是与吸附柱组合的方法是能够精制高纯度核酸的优异方法。

但是，该方法需要熟练的研究者在设备齐备的实验室等中使用离心机或微量移液器、旋涡混合器、培养箱等理化学机器进行作业，是技术难度高的作业。实际上，在需要进行基因检查的医疗、农畜水产、食品等领域中，不具备具有所需技术的人才或设备的机构也很多。这种机构中，实际情况是将本来能够在短时间内进行结果判定的基因检查委托至花费时间和费用的外单位，无法充分地发挥作为基因检查特征的结果判定的迅速性。

另外，成为基因检查对象的样品多是病毒或细菌等具有病原性的物质，对检查作业者的感染风险经常成为问题。因此，基因检查多需要使用对应于生物安全等级的装备、设备，这些设备或装备的使用对于不需要其的情况而言，是非常繁琐的操作。实际情况是会对作业者造成很大的负担。

专利文献3中公开了使含有自样品溶解析出的核酸的核酸提取液接触于沸石、使不需要的物质吸附在沸石上，对核酸进行精制的方法，但该方法不具有如结合-洗脱法那样对核酸进行浓缩精制的能力，存在依赖于样品中的核酸浓度的课题。另外，能够吸附除去的杂质是有限的，精制度比结合-洗脱法差，在代替结合-洗脱法方面技术水平还不足。

专利文献4中公开了用于痰中所含抗酸杆菌的基因检测的前处理方法。该方法的目的是从痰中将抗酸杆菌的菌体分离，而并非是从痰中对基因(核酸)进行提取的方法。

专利文献5中公开了适于自动化及小型化、使用了核酸吸附性多孔性膜的核酸的分离精制方法。专利文献5中作为核酸吸附性多孔性膜，其特征在于使用核酸以与离子键实质上无关的相互作用吸附的多孔性膜。专利文献5的方法仍无法解决现有的结合-洗脱法的上述课题。

专利文献6中公开了用于使溶液中的核酸吸附在固相载体上的促溶剂的组成。但是，专利文献6中未公开用于解决现有的结合-洗脱法的上述课题的手段。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2001-78790号公报

专利文献2：日本特表2014-526255号公报

专利文献3：国际公开WO2009/060847

专利文献4：日本特开2009-100688号公报