[发明专利]加利车霉素-抗体-药物缀合物和使用方法

说明书

本发明大体上涉及用离去基团来活化的加利车霉素分子。本发明还大体上涉及抗体‑药物缀合物，所述缀合物包含通过二硫键直接缀合至一个或多个加利车霉素分子的抗体。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2015年10月20日提交的美国临时申请序列号62/243,967的优先权。

发明领域

本发明的领域大体上涉及包含与一种或多种加利车霉素分子直接缀合的抗体的抗体-药物缀合物。

背景

加利车霉素和加利车霉素衍生物是指抗细菌剂和抗肿瘤剂的家族，如例如在美国专利号4,970,198(其整体并入本文)中描述。本公开范围内的加利车霉素衍生物包括但不限于如美国专利号5,037,651中所述的二氢衍生物和美国专利号5,079,233中所述的N-酰化衍生物(两者均整体并入本文)。如本文所用，加利车霉素衍生物是指在一个或多个位置被取代以获得不同化合物的加利车霉素。

抗生素的加利车霉素家族及其衍生物和类似物能够在亚皮摩尔浓度下引起双链DNA断裂(Hinman等人,(1993)Cancer Research53:3336-3342；Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33:183-186；Lode等人,(1998)Cancer Research 58:2925-2928)。加利车霉素包含含有烯二炔环结构(包含侧接有三键的双键的环)和甲基三硫醚(即-S-S-S-CH₃)基团的弹头。据信，弹头是通过还原二硫键而活化的，并且活化的弹头通过在双链DNA中引起断裂而起作用。Bouchard，H.等人，Ab-drug conjugates-A new wave of cancer drugs，BioorganicMedicinal Chemistry Letters 24(2014)5357-5363提出了作用机制，其中烯二炔环通过以下步骤的二硫键的还原裂解而得以活化：(i)通过甲基三硫醚部分的亲核攻击和CH₃-S-S-的裂解形成加利车霉素＝CHCH₂SH部分，(ii)由加利车霉素＝CHCH₂SH形成稠合的2,5-二氢噻吩环，和(iii)由烯二炔形成稠苯双自由基。活化的加利车霉素然后将双链DNA裂解。

加利车霉素具有细胞内作用位点，但在某些情况下不易于跨越质膜。因此，在一些实施方案中，这类药剂经由抗体介导的内化实现的细胞摄取可极大增强细胞毒性作用。已知加利车霉素-接头-抗体缀合物提供抗体的特异性和有效的质膜渗透性(内化)以及加利车霉素的细胞毒性效力。因此，在某些方面，加利车霉素的细胞摄取可能大大增强其细胞毒性作用。形成加利车霉素-接头-抗体药物缀合物的方法是已知的，并且例如在美国专利号5,877,296、5,773,001、5,712,374、5,714,586、5,739,116和5,767,285(其每一个通过引用并入本文)中进行了描述。

包含抗体-接头-药物缀合物的抗体-药物缀合物是有吸引力的靶向化疗分子，因为它们通过将有效的细胞毒性药物靶向表达抗原的肿瘤细胞，由此增强了它们的抗肿瘤活性，从而将抗体和细胞毒性药物的理想特性结合起来。针对给定靶抗原的成功的抗体-药物缀合物开发取决于抗体选择、接头稳定性、细胞毒性药物效力和与抗体的接头-药物缀合模式的优化。更特别地，有效的抗体-药物缀合物的特征在于以下至少一种或多种：(i)抗体-药物缀合物形成方法，其中所述抗体对靶抗原保留足够的特异性并且其中药物功效得以维持；(ii)抗体-药物缀合物稳定性足以限制血液中的药物释放以及伴随的对非靶向细胞的损害；(iii)足够的细胞膜转运效率(胞吞作用)以实现治疗性细胞内抗体-药物缀合物浓度；(iv)足以实现治疗药物浓度的来自抗体-药物缀合物的足够的细胞内药物释放；和(v)纳摩尔或亚纳摩尔量的药物细胞毒性。