[发明专利]用于评估多能干细胞的遗传完整性的无创方法

说明书

本发明涉及一种用于评估培养物中多能干细胞质量的新颖的无创方法。更具体地，本发明涉及用于评估培养物中多能干细胞的遗传完整性的无创方法。

技术领域

本发明总体涉及再生医学领域。更具体地，本发明涉及用于测定多能干细胞的质量的无创方法和试剂盒。更具体地，本发明涉及用于评估培养物中多能干细胞的遗传完整性的无创方法和试剂盒。

背景技术

人多能干细胞(hPSC)研究通过产生用于移植的人细胞或启动药物发现为帮助理解和治疗影响体内不同细胞类型的疾病提供了新的工具。PSC(从废弃胚胎分离的内细胞团，即人胚胎干细胞(hESC)，或源自分化细胞，即诱导的多能干细胞(iPSC))具有迅速扩增的非凡能力。在实际水平，这意味着可以从一个细胞系产生制备数千、甚至成数十万的治疗学细胞剂量的足够细胞。已经进行或目前正在进行使用hESC的分化衍生物的若干临床试验：Geron公司(NCT01217008)测试了hESC衍生的少突细胞在脊髓损伤患者中的安全性。Advanced Cell Technology(ACT)测试了hESC衍生的视网膜色素上皮(RPE)细胞疗法对于Stargardt黄斑营养不良(SMD)(美国试验:NCT01345006；英国试验:NCT01469832；韩国试验:NCT01625559)和干性年龄相关的黄斑变性(美国试验:NCT01344993；韩国试验:NCT01674829)的安全性。Viacyte正在测试胰岛素产生细胞在患有I型糖尿病的受试者中的安全性和功效(美国试验：NCT02239354)。Philippe Ménasché开始测试(NCT02057900)在严重的心力衰竭中移植人胚胎干细胞衍生的祖细胞。Pfizer(NCT01691261)研究利用源自hESC的移植的视网膜细胞治疗患有晚期Stargardt病的患者的安全性。最后，一项由来自RIKEN研究所的Masayo Takahashi进行的研究最近在日本开始，其测试在患有渗出型(湿型)年龄相关的黄斑变性(AMD)的患者中移植自体诱导的多能干细胞(iPSC)衍生的视网膜色素上皮(RPE)细胞片的安全性。

所有这些临床试验表明生物医学潜力是巨大的，但若干实际问题仍待解决。最大问题之一是遗传异常。

遗传异常是hPSC用于再生医学的严重问题。如果hPSC克隆显示遗传异常，这些细胞及其分化的子代可能不能可靠地复制正常成人的组织生理，在临床场景中使用这些细胞甚至可能是威胁。因此，必须测定这种细胞中遗传异常的起因和程度。遗传畸变可以分成两种类型，通过细胞培养诱导的那些和通过细胞重编程过程诱导的那些。